Đánh giá hoạt động thực bào. Xác định hoạt động thực bào của bạch cầu, phân tích dữ liệu và chức năng tế bào Hoạt động thực bào của tế bào
Các vấn đề của việc nhịn ăn điều trị. Nghiên cứu lâm sàng và thực nghiệm [tất cả bốn phần!] Anokhin Petr Kuzmich
Hoạt động thực bào của bạch cầu máu ngoại vi trong thời gian đói hoàn toàn và dinh dưỡng sau đó của người Yu. L. SHAPIRO, Yu. S. NIKOLAEV, A. Ya. TABAKH, L. F. LEVINA (Moscow)
Hoạt động thực bào của bạch cầu máu ngoại vi trong thời kỳ đói hoàn toàn và dinh dưỡng sau đó của người
Y. L. SHAPIRO, Y.S. NIKOLAEV, A. Y. TABAKH, L. F. LEVINA (Mátxcơva)
Một số nghiên cứu được dành cho việc nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu trong thời gian đói hoàn toàn kéo dài.
Theo một số tác giả, hoạt động thực bào trong thời gian đói ngắn hạn (đến 36 giờ) tăng gấp 3 lần (3). Hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính từ dịch tiết của phúc mạc của chuột bị đói cho đến giai đoạn kèm theo giảm trọng lượng cơ thể 25-30% so với giá trị ban đầu không thực sự thay đổi (10).
Chúng tôi thực hiện một nghiên cứu về hoạt động thực bào của bạch cầu máu ngoại vi ở 21 bệnh nhân tâm thần trong quá trình nhịn ăn chữa bệnh và trong thời gian phục hồi sức khỏe sau đó. Trong số những người được kiểm tra có 19 nam và 2 nữ. Tuổi từ 25 đến 40 tuổi.
Theo chẩn đoán, các bệnh nhân được phân bố như sau: tâm thần phân liệt, thể đơn - 4; tâm thần phân liệt, dạng hoang tưởng - 1; hội chứng hypochondriac - 7; sự phát triển nhân cách đạo đức giả trên cơ sở soma-3, trầm cảm - 1; hội chứng suy nhược thần kinh-1; nỗi ám ảnh-1; hội chứng não, ảnh hưởng còn lại của tổn thương nhiễm trùng của hệ thống thần kinh trung ương - 1; bệnh hữu cơ của hệ thần kinh trung ương-1.
Thời gian nhịn ăn y tế dao động từ 17 đến 37 ngày. Trọng lượng cơ thể giảm không vượt quá 20% giá trị ban đầu.
Hoạt động thực bào của bạch cầu được xác định bằng phương pháp của E.A.Kost và M.I.Stenko (6).
Bảng 1
Số lượng thực bào
ban 2
Chỉ số thực bào
Kỹ thuật này bao gồm những điều sau: một hỗn hợp bao gồm 1 thể tích natri xitrat 5%, 2 thể tích máu và thể tích I của dịch nuôi cấy Staphylococcus aureus sống trong một ngày ở độ pha loãng 2 triệu được đặt trong máy điều nhiệt ở 37 ° C để 30 phút. Từ hỗn hợp, người ta chuẩn bị các vết bẩn, được cố định bằng rượu metylic. Việc nhuộm được thực hiện theo Romanovsky - Giemsa.
Các phết tế bào đếm số lượng bạch cầu trung tính được thực bào trên 100 tế bào và số lượng vi khuẩn bị thực bào trong một bạch cầu trung tính. Số lượng tế bào bị thực bào trên 100 bạch cầu trung tính được gọi là "số lượng thực bào" - F. Ch. Số lượng vi khuẩn bị thực bào trung bình bởi một bạch cầu trung tính được gọi là "chỉ số thực bào" hoặc "chỉ số thực bào" - F. P.
Cùng với việc xác định chỉ số thực bào và thực bào. số nghiên cứu cường độ tiêu hóa của vi sinh vật. Vì mục đích này, chất sau được chia thành ánh sáng (trải qua quá trình ly giải đáng kể) và tối (ly giải ít rõ ràng hơn). Ngoài ra, mức độ biến đổi của khả năng thực bào của tụ cầu bởi các bạch cầu trung tính riêng lẻ cũng được tính đến (V tính bằng%).
Trong hầu hết các trường hợp, các nghiên cứu được thực hiện dựa trên động lực của việc nhịn ăn và chế độ dinh dưỡng sau đó. Dữ liệu thu được được nhóm theo thời gian được phân bổ cho tình trạng này ở người (Yu.S. Nikolaev) (2), được xử lý thống kê và được tóm tắt trong bảng 1, 2, 3.
bàn số 3
Tiêu hóa nội bào của tụ cầu
Như có thể thấy từ Bảng 1, số lượng thực bào (F. Ch.), Được tính trung bình trong tất cả các giai đoạn nhịn ăn và cho ăn sau đó, thực tế không khác với mức ban đầu (trước khi bỏ đói) (P> 0,1).
Chỉ số thực bào (FP), phản ánh cường độ thực bào, hóa ra ổn định như số lượng thực bào trong tất cả các giai đoạn nhịn ăn và cho ăn sau đó (P> 0,05).
Từ bảng 3 có thể thấy rằng quá trình tiêu hóa nội bào của tụ cầu (trong các nghiên cứu của chúng tôi được xác định bằng tỷ lệ giữa số lượng vi khuẩn không tiêu hóa tối và vi sinh ly giải nhẹ hơn) trong tất cả các thời gian nhịn ăn và dinh dưỡng được khảo sát không thay đổi đáng kể.
Vì vậy, các chỉ số trung bình phản ánh mức độ và cường độ hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính máu ngoại vi trong các giai đoạn nghiên cứu về chế độ ăn đói hoàn toàn (từ 17 đến 37 ngày) và dinh dưỡng tiếp theo trong các điều kiện và trong thời gian quan sát của chúng tôi vẫn có giá trị khá ổn định .
Cùng với điều này, một loạt các phản ứng cá nhân đã được ghi nhận. Vì vậy, trong 7 lần quan sát, số lượng thực bào và chỉ số thực bào giảm rõ ràng được tìm thấy trong giai đoạn nhịn ăn đầu tiên (1-4 ngày), sau đó, theo quy luật, sự gia tăng của chúng lại được ghi nhận, và vào cuối giai đoạn nhịn ăn. (trong những lần quan sát này là 17-27 ngày) chúng đã đạt đến mức của các số liệu ban đầu.
Để minh họa, chúng tôi trình bày nhận xét sau:
Bệnh nhân A-va, sinh năm 1937, nhập viện ngày 27 / XI-65, được chẩn đoán mắc chứng TIR ?, trạng thái trầm cảm. Giảm cân khi nhịn ăn 7 kg 500 g (12,8% so với ban đầu) (Bảng 4).
Trong 6 lần quan sát khác, trong thời kỳ đầu tiên bị bỏ đói, ngược lại, sự gia tăng số lượng thực bào và chỉ số thực bào được tìm thấy. Trong các thời gian nhịn ăn tiếp theo, các chỉ số này có giảm nhẹ, nhưng đến khi kết thúc nhịn ăn (18-22 ngày), các chỉ số này lại đạt giá trị ban đầu.
Như một minh họa, chúng tôi trình bày quan sát sau đây. Bệnh nhân A, sinh năm 1928, nhập viện vào ngày 28 / X-65 tuổi, chẩn đoán là sự phát triển của một nhân cách thái nhân cách bị suy nhược thần kinh. Giảm cân khi nhịn ăn 12 kg (16,9% so với ban đầu) (Bảng 5).
Điều thú vị cần lưu ý là sự song song trong sự thay đổi số lượng thực bào và chỉ số thực bào hầu như chỉ được quan sát thấy trong thời kỳ đầu tiên của quá trình bỏ đói. Về lâu dài, có thể thấy rằng thường số lượng thực bào giảm, chỉ số thực bào tăng lên, điều này cho thấy sự tăng cường thực bào. Trong các nghiên cứu này, sự thay đổi tối đa về số lượng vi khuẩn thực bào cũng được tìm thấy (từ 2-4 và 23-25 ban đầu thành 2-4 và 32-42 vào ngày thứ 7 nhịn ăn).
Bảng 4
Các chỉ số về hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính ở bệnh nhân A-oh
Bị bỏ đói trong 19 ngày
Năm sinh - 1937.
Chẩn đoán: TIR? Trạng thái trầm cảm.
Giảm trọng lượng - 7 kg 500 g (12,8% so với ban đầu)
Các chỉ số về hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính của bệnh nhân A.
Bị bỏ đói trong 22 ngày
Năm sinh - 1928.
Chẩn đoán: sự phát triển của một nhân cách thái nhân cách.
Giảm cân - 12 kg (16,9% so với ban đầu).
Như đã đề cập ở trên, hoạt động thực bào của bạch cầu trong quá trình đói hoàn toàn và chế độ dinh dưỡng sau đó của con người trên thực tế vẫn chưa được nghiên cứu. Theo quan niệm hiện đại, quá trình thực bào, phản ánh một trong những đặc tính chức năng chính của bạch cầu, phụ thuộc ít nhất vào các điều kiện sau: 1) các đặc tính sinh học, hóa lý và các đặc tính khác của đối tượng bị thực bào; 2) ảnh hưởng của môi trường xung quanh thực bào và đối tượng bị thực bào (protein, lipid, thành phần ion của huyết tương, hàm lượng opsonin, nồng độ heparin, hormone steroid, v.v.); 3) trạng thái chức năng của chính tế bào thực bào.
Kể từ thời II Mechnikov làm việc, quan điểm đã được khẳng định chắc chắn rằng. đặc điểm của môi trường và đối tượng thực bào chỉ có tác dụng kích thích hoặc ức chế hoạt động của quá trình thực bào. Tầm quan trọng chính được gắn vào hoạt động chức năng của chính các tế bào thực bào, trong trường hợp này là các vi thể - bạch cầu trung tính (1).
Cần nhấn mạnh rằng việc nghiên cứu một loạt các đặc điểm phản ánh các đặc tính chức năng của bạch cầu trong thời kỳ đói hoàn toàn và dinh dưỡng sau đó được dành cho các công trình cô lập. Do đó, sự giảm hàm lượng của các hạt cụ thể trong tế bào chất của chuột đói đã được quan sát thấy (4). Yu. L. Shapiro (8) đã ghi nhận sự biến mất của tế bào chất (giảm basophilia trong đó), giảm số lượng và độ lớn của hạt bạch cầu trung tính. starvationists ”(thời gian nhịn ăn từ 9 đến 40 ngày). Những thay đổi này tăng lên về mặt định lượng và chất lượng khi thời gian nhịn ăn kéo dài. Những thay đổi tương tự cũng được tìm thấy trong tủy xương trong các tế bào của chuỗi dòng tủy. Những thay đổi này được tìm thấy rõ ràng nhất ở các yếu tố trưởng thành hơn (tế bào tủy trưởng thành theo Rohr, đâm, phân đoạn). Đồng thời, sự giảm mạnh của các tế bào đang phân chia nguyên phân của chuỗi tế bào tủy cũng được ghi nhận. Sau khi ngừng nhịn ăn (sau một khoảng thời gian tiềm ẩn nhất định), những thay đổi này trải qua một sự phát triển ngược lại. Hơn nữa, song song với sự gia tăng basophilia, sự gia tăng số lượng và sự mở rộng của hạt bạch cầu trung tính, sự gia tăng hoạt động migotic của các tế bào dòng tủy đã được ghi nhận, và sự tăng trưởng bạch cầu trung tính với sự chuyển dịch "tái sinh" của nhân sang trái đã được ghi nhận trong máu ngoại vi.
Theo một số dữ liệu, khi nghiên cứu hoạt động vận động của các tế bào bạch cầu trong 28-30 ngày nhịn ăn điều trị, 7 bệnh nhân cho thấy xu hướng giảm nhẹ "tốc độ" của bạch cầu chỉ vào cuối thời gian nhịn ăn được chỉ định ( từ 19,9 µ / phút lúc đầu đến 17,7 µ / phút sau 28-30 ngày nhịn ăn) (5). Đồng thời, có sự giảm số lượng bạch cầu trung tính tích cực di chuyển từ 51 xuống 31%, tăng nhẹ số lượng bạch cầu trung tính chậm chạp trong kiểu di chuyển đầu tiên (từ 32,1% lên 44,8%). Có một điều thú vị là số lượng bạch cầu trung tính bất động, vốn rất ít kể cả trước nạn đói, đã không tăng trong thời gian nhanh chóng. Sự gia tăng không bào của tế bào chất của bạch cầu trung tính cũng được ghi nhận, biểu hiện rõ nhất khi nhịn ăn 28-30 ngày. Sau khi ngừng nhịn ăn, hoạt động vận động của bạch cầu trung tính tăng lên, số lượng không bào giảm. Hoạt động của bạch cầu trung tính được biểu hiện rõ ràng nhất từ 12 đến 16 ngày của thời kỳ hồi phục. Đương nhiên, những dữ liệu này thực sự liên quan đến thời gian nhịn ăn ban đầu. Trong các điều khoản cuối cùng, một bức tranh khác được quan sát thấy. Do đó, theo một số dữ liệu, cường độ di chuyển của amip của bạch cầu thu được từ động vật bị chết đói giảm nhanh hơn ở những con không bị chết đói (13). Dumm (9), ủ hỗn dịch bạch cầu máu ngoại vi thu được từ những người khỏe mạnh đang đói trong cùng huyết tương có bổ sung glucose (2-2,5 phần ở 37 ° C), xác định sự giảm glucose và tăng axit lactic. Theo dữ liệu của ông, mức tiêu thụ glucose của bạch cầu ở những người khỏe mạnh lúc đói thấp hơn một chút so với những người được ăn uống đầy đủ; tuy nhiên, sự khác biệt là không có ý nghĩa thống kê. Việc sản xuất axit lactic bởi bạch cầu thu được từ những người chết đói không khác với lượng sản xuất bởi những người được cho ăn. Điều thú vị là, việc bổ sung insulin vào môi trường không phải lúc nào cũng làm tăng tiêu thụ glucose bởi bạch cầu của những người nhịn đói và tăng tiêu thụ glucose trong hỗn dịch của bạch cầu thu được từ những người no.
Có thể thấy rằng số liệu nghiên cứu một số chỉ tiêu phản ánh đặc tính chức năng của bạch cầu là rất ít và chúng cũng khó giải thích sự ổn định của hoạt động thực bào, được ghi nhận trong quan sát của chúng tôi.
Không nghi ngờ gì nữa, vấn đề này đòi hỏi một nghiên cứu toàn diện về nhiều thông số, phản ánh cả trạng thái chức năng của chính bạch cầu (hàm lượng các chất năng lượng, các enzym, v.v.) và các yếu tố môi trường.
Về các tính năng của hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính, được ghi nhận trong thời kỳ đói đầu tiên (có thể giả định), chúng phụ thuộc vào sự xuất hiện trong máu ngoại vi của hai quần thể bạch cầu khác nhau. Vì vậy, Yu. L. Shapiro (7) đã quan sát thấy trong máu ngoại vi khi đói có cả bạch cầu trung tính "với một" nhân nhỏ "rời rạc, hai đoạn, kích thước lớn, và đồng thời bạch cầu trung tính chứa 4-5 phân đoạn tăng sắc độ, kích thước nhỏ. Những dữ liệu này sau đó đã được xác nhận bằng thực nghiệm. Một số tác giả lưu ý rằng ở những con chó đói được đưa lá lách ra ngoài, số lượng bạch cầu trong máu ở động mạch đùi thấp hơn 50% so với trong máu từ động mạch đùi (12). Trong trường hợp này, nhân của bạch cầu hạt ngoại vi, máu trong hầu hết các tế bào chứa 2-3, và trong lá lách có 4-5 hoặc nhiều phân đoạn. Sau khi lách bị kích thích, số lượng bạch cầu hạt đa phân trong máu ngoại vi tăng lên đáng kể. Các tác giả kết luận rằng trong quá trình hình thành kho trong lá lách, các tế bào hạt trưởng thành hơn được giữ lại một cách chọn lọc trong đó.
Có thể giả định rằng trong thời gian đầu tiên nhịn ăn (được coi là giai đoạn lo lắng của hội chứng thích ứng theo Selye), một phần của bạch cầu trung tính đa phân đoạn được thải ra khỏi lá lách. Nhóm đầu tiên (bạch cầu trung tính phân đoạn nhỏ) có lẽ đi vào máu ngoại vi từ tủy xương. Có thể giả định rằng các đặc điểm của phản ứng thực bào khi đói hoàn toàn, đặc biệt là trong thời kỳ đầu của nó, phần lớn phụ thuộc vào tỷ lệ của các quần thể bạch cầu trung tính này (khác nhau về "tuổi" và do đó, về mặt chức năng).
Câu hỏi vẫn còn bỏ ngỏ về tầm quan trọng của sự di chuyển trong quá trình đói của bạch cầu trung tính cùng với chylomicrons vào mạng lưới mao mạch của phổi, từ đó, như đã biết, chúng có thể quay trở lại máu ngoại vi một lần nữa (11).
Nhìn chung, như có thể thấy từ dữ liệu được trình bày, hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính trong thời gian người ta bỏ đói hoàn toàn trong các điều kiện và thời gian quan sát của chúng tôi vẫn còn khá nguyên vẹn. Các cơ chế cụ thể cơ bản về sự ổn định của các đặc tính bảo vệ của bạch cầu trong quá trình nhịn ăn vẫn còn chưa được hiểu rõ, điều này tự nhiên nên kích thích các nghiên cứu sâu hơn.
VĂN HỌC
1. Ado AA Sinh lý bệnh của thực bào. M., năm 1961.
2. Nikolaev Yu S.S. Sự phản đối. doct., M., 1959.
3. Các bào quan X. Thực bào B.M.E., M., 1963, ed. 2, tập 33, tr. 428.
4. Ryzhikh R. N. D. Viện Hàn lâm Khoa học Liên Xô, 1952, tập 37, số 6, tr. 1051.
5. Với r và khoảng p khoảng trong và V. X., Khoteev và G. I. Vopr. Lý thuyết và thực tiễn Chồng yêu. Rostov-on-Don, 1965, tr. 68.
6. Todorov I. Nghiên cứu phòng thí nghiệm lâm sàng trong nhi khoa. Sofia, 1963, xuất bản lần thứ 4, 382.
7. Shapiro Yu. L. Chuyên gia và sinh lý bệnh học. trị liệu cho họ. V.V. Pashutin, 1963, 1, tr. 39.
8. Shapiro Yu L. Tình trạng của hệ thống máu với tình trạng đói hoàn toàn trong thời gian dài và chế độ dinh dưỡng tiếp theo của con người. Sự phản đối. Cand., M., 1964.
9. Duram M. E. Proc. Soc. Exptl. Biol, và Med., 1957, 95, No. 3, tr. 571.
10.C u với t an o L., Fe g i với i i o S. T. Rend., CI. khoa học. fis., mat., e natur., 1960 (1961), 29, No. 5, tr. 424.
11. Cnderblitzen Th. Schweiz. ned Wochenschz, 1954, 84, Không. 40, P-1150.
12. Ludan G., Rigo C., Budavari G., Han To Wu (1964) Med. exptl., 1964, 11, Không. 2, 105-109.
13. Nagac T. Nagasaki igakkai Zassci, Nagasaki Med. G., 1958, 33, Không. 5, tr. 570,
Từ cuốn sách Những vấn đề của việc nhịn ăn điều trị. Nghiên cứu lâm sàng và thực nghiệm [tất cả bốn phần!] tác giả Anokhin Petr KuzmichKinh nghiệm chữa béo phì bằng phương pháp bỏ đói hoàn toàn D. D. FEDOTOV, Yu. S. NIKOLAEV, Yu. L. Shapiro, GI BABENKOV, VB GURVICH (Matxcova) Điều trị béo phì vẫn là một trong những vấn đề cấp bách của y học hiện đại. Số lượng bệnh nhân thừa cân, theo nhiều
Từ sách của tác giảErythron trong thời gian đói kéo dài và dinh dưỡng sau đó của những người N.A.FEDOROV, Yu.L. SHAPIRO (Moscow)
Từ sách của tác giảCường độ của các quá trình tạo hồng cầu trong thời gian con người chết đói (phân tích toán học) Yu.L. SHAPIRO, V.M. LUGOVSKOY (Moscow)
Từ sách của tác giảSắt huyết thanh và hồng cầu trong thời gian đói kéo dài của những người Yu. L. SHAPIRO, L. M. DONDYSH, L. M. LEYBIN, E. A. LEYZEROVICH, L. F. LEVINA (Moscow) Dữ liệu về hàm lượng sắt trong phần lỏng của máu ở chế độ ăn kiêng hoàn toàn và chế độ dinh dưỡng tiếp theo là rất ít và
Từ sách của tác giảChỉ số về mức độ bão hòa oxy trong máu khi điều trị đói V. B. GURVICH, Yu. L. SHAPIRO, M. V. SAMOILOVA (Moscow)
Từ sách của tác giảĐộng thái của các chỉ số máu ngoại vi khi nhịn ăn ở bệnh nhân cao huyết áp và béo phì G.N.BZHISHKYAN-BORODINA (Mátxcơva) Các dữ liệu tài liệu về nghiên cứu thành phần của máu ngoại vi khi nhịn ăn là
Từ sách của tác giảNghiên cứu so sánh ảnh hưởng của việc bỏ đói hoàn toàn lâu dài và thiếu protein lên thành phần máu ngoại vi của chuột CC57Br I. L. POVERIY và V. I. PRILYATSKY (Mátxcơva) Bỏ đói hoàn toàn hoặc một phần là một mô hình thực nghiệm thuận tiện để nghiên cứu ảnh hưởng của
Từ sách của tác giả Từ sách của tác giảpH huyết thanh của bệnh nhân trong thời gian đói điều trị V. A. SKORIK-SKVORTSOVA, V. A. KULACHKOV (Moscow) Người ta biết rằng cái gọi là "hằng số cứng" không thay đổi trong cơ thể trong một thời gian dài.
Từ sách của tác giảVề tác động của việc bỏ đói hoàn toàn trong thời gian dài trên bộ máy nhiễm sắc thể của tế bào lympho máu ngoại vi K.N. GRINBERG, Yu, L. SHAPIRO, E.A.KIRILOVA, R.S. KUSHNIR (Moscow)
Từ sách của tác giảNhững thay đổi về số lượng và một số thông số của chất nhiễm sắc giới tính ở người trong quá trình bỏ đói hoàn toàn trong thời gian dài và chế độ dinh dưỡng sau đó S. N. REZINA, Yu. L. SHAPIRO (Moscow) Chất nhiễm sắc giới tính là một cơ thể nội nhân tạo ra phản ứng dương tính với Felgen
Từ sách của tác giảTRẠNG THÁI PHẢN ỨNG MIỄN DỊCH CỦA CƠ THỂ CON NGƯỜI TRONG THỜI GIAN TỔNG SỐ LƯỢNG NHANH CHÓNG Yu.S. NIKOLAEV, V.A.
Từ sách của tác giảTài liệu để nghiên cứu sự thích ứng của enzym trong quá trình bỏ đói hoàn toàn trong điều trị A. A. Pokrovsky, Yu. S. Nikolayev, G. K. Pyatnitskaya, G. I. BABENKOV (Moscow) Trong những năm gần đây, một số lượng lớn những người ủng hộ việc sử dụng nhịn ăn cho mục đích điều trị với
Từ sách của tác giảSự thay đổi hoạt động của một số enzym trong máu và gan của chuột khi bỏ đói thí nghiệm A. A. Pokrovsky, G. K. Pyatnitskaya (Mátxcơva)
Từ sách của tác giảThành phần hóa học của mô chuột khi chết đói hoàn toàn V.I.DOBRYNINA (Moscow) Ăn chay như một phương pháp điều trị đã được chứng minh thành công trong một số bệnh tâm thần và soma (3, 7, 10-13). Công dụng của nó đặc biệt hứa hẹn đối với bệnh chuyển hóa, dị ứng
Từ sách của tác giảMột số dữ liệu về chuyển hóa protein-nitơ trong quá trình nhịn ăn y tế của bệnh nhân tâm thần L. I. LANDO, Yu. S. NIKOLAEV, Yu. L. SHAPIRO, G. Ya. BABENKOV (Moscow) Chuyển hóa protein-nitơ trong quá trình đói dinh dưỡng hoàn toàn như trong thí nghiệm trên động vật và con người
Nguyên tắc của phương pháp. Một số tế bào bạch cầu (bạch cầu hạt và ở mức độ thấp hơn là bạch cầu đơn nhân) có khả năng hấp thụ trong ống nghiệm và in vivo và thường tiêu diệt các phần tử lạ bằng cách sử dụng các enzym của chúng. Hơn nữa, bản thân quá trình này cũng trải qua một số giai đoạn, bao gồm phản ứng hóa học, thực bào, tiêu diệt vi khuẩn và tiêu hóa các chất được hấp thụ. Khi tiếp xúc nhiều lần hoặc chủng ngừa cụ thể, các tế bào được opso hóa, tức là, khả năng này được tăng cường. Một số lượng lớn các phương pháp xác định hoạt động thực bào của tế bào máu đã được phát triển. Đối với những mục đích này, một hệ thống thử nghiệm cụ thể được sử dụng (một loại vi sinh cụ thể, zymosan). Trong một số trường hợp, phản ứng được thực hiện trong ống nghiệm hoặc đĩa Petri trên thạch, và trong những trường hợp khác - bên trong cơ thể động vật (nội mạch, trong phúc mạc, hoặc bằng phương pháp "cửa sổ sừng").
Tiến độ xác định.
1. Chuẩn bị hệ thống thử: huyền phù vi sinh với hàm lượng 1-2 tỷ thể trong 1 ml theo tiêu chuẩn quang học.
2. Pha dung dịch natri xitrat 2%, máu và huyền phù vi sinh vật theo tỷ lệ 1: 2: 1 rồi ủ trong 30 phút ở nhiệt độ 40,5 ° C.
3. Ly tâm ở tốc độ 1500 vòng / phút trong 10 phút và chuẩn bị các vết bẩn trên lam kính từ lớp trên của cặn và trên thạch trong đĩa Petri.
4. Cố định chế phẩm bằng cồn metylic trong 3 - 5 phút và nhuộm theo Romanovsky - Giemsa trong 10 - 15 phút.
5. Tính đến phản ứng. Trong các vết bẩn nhuộm dưới kính hiển vi (tăng 90x7), 100 bạch cầu trung tính hoặc bạch cầu đơn nhân, có hoặc không chứa vi khuẩn, được đếm, có tính đến số lượng vi khuẩn trong tế bào và mức độ màu của chúng (tiêu hóa). Tính tỷ lệ phần trăm tế bào được thực bào - một chỉ số hoạt động, và số lượng vi khuẩn trung bình trên một tế bào thực bào - một chỉ số thực bào; Tỷ lệ giữa số lượng vi khuẩn được tiêu hóa trên tổng số tế bào được thực bào cho biết tỷ lệ phần trăm của quá trình tiêu hóa, và số lượng trung bình trên mỗi tế bào thực bào của chúng cho chỉ số tiêu hóa.
Để đánh giá định lượng khả năng tiêu hóa của thực bào, người ta đưa ra khái niệm về chỉ số hoàn thành thực bào. Để làm được điều này, người ta xác định tỷ lệ giữa tỷ lệ thực bào thu được sau 30 phút ủ và tỷ lệ thực bào sau 2 giờ và tỷ lệ giữa các chỉ số thực bào được xác định. Người ta thường chấp nhận rằng nếu chỉ số hoàn toàn của quá trình thực bào lớn hơn 1 thì quá trình thực bào là hoàn toàn, nếu ít hơn thì không hoàn toàn. Để đánh giá mức độ gia tăng hoạt động thực bào của bạch cầu trong quá trình chủng ngừa đặc hiệu, chỉ số opsonophagtic được tính toán liên quan đến tỷ lệ số lượng thực bào ở động vật được chủng ngừa và đối chứng. Ở động vật sơ sinh, nên tính khả năng đào thải của bạch cầu trong máu bằng số lượng vi khuẩn thực bào tuyệt đối của tất cả các tế bào thực bào có trong 1 μl máu, tức là, để thu được giá trị tuyệt đối.
Nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu là một xét nghiệm máu, nhằm xác định khả năng dự trữ của bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân để thực hiện chức năng chính của chúng - hấp thụ và xử lý các tác nhân lạ. Thử nghiệm được thực hiện trong một chương trình miễn dịch phức tạp. Nó được chỉ định cho những bệnh nhân bị nhiễm trùng tái phát và mãn tính, các tình trạng suy giảm miễn dịch mắc phải và di truyền, các bệnh tự miễn dịch và ung thư đã trải qua các cuộc phẫu thuật phức tạp, bao gồm cả cấy ghép nội tạng. Máu toàn phần được phân tích. Nghiên cứu dựa trên đánh giá khả năng thực bào của vi khuẩn bằng nhãn huỳnh quang. Thông thường, bạch cầu hạt thực bào chiếm từ 82 đến 90% tổng số, bạch cầu đơn nhân thực bào - từ 75 đến 85%. Sự sẵn sàng của kết quả - lên đến 8 ngày.
Hoạt động thực bào của bạch cầu là một chỉ số trong phòng thí nghiệm phản ánh tỷ lệ phần trăm bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân có khả năng liên kết với hệ vi sinh gây bệnh và quá trình tiêu hóa của nó. Thực bào là những tế bào bảo vệ cơ thể khỏi bị nhiễm trùng. Chúng được coi là một thành phần của khả năng miễn dịch bẩm sinh, trong máu chúng được đại diện bởi hai loại bạch cầu - bạch cầu đơn nhân và bạch cầu trung tính. Bạch cầu đơn nhân là những tế bào lớn được gọi là đại thực bào. Chúng có khả năng hấp thụ, xử lý tế bào lớn và các hợp chất hữu cơ rõ rệt. Tại vị trí viêm, chúng thực bào vi khuẩn, khối bạch cầu và các tế bào bị ảnh hưởng. Kết quả là, các mô được làm sạch và chuẩn bị để tái sinh. Bạch cầu trung tính là vi đại bào, không giống như bạch cầu đơn nhân, chúng chỉ hấp thụ các tế bào nhỏ và các thành phần hữu cơ. Sau khi xử lý các tác nhân, bạch cầu trung tính chết, giải phóng các chất gây hại cho vi khuẩn và nấm, đồng thời tăng dòng tế bào miễn dịch đến vị trí viêm.
Xét nghiệm máu về hoạt động thực bào của bạch cầu giúp đánh giá khả năng dự trữ của bạch cầu đơn nhân và bạch cầu trung tính để tiêu hóa các tác nhân lạ. Những thay đổi về đặc điểm của tế bào thực bào không chỉ phản ánh phản ứng miễn dịch của cơ thể, mà còn phản ánh các tính năng của một số quá trình khác - chuyển hóa protein và carbohydrate, sự hiện diện của tình trạng nhiễm độc và suy kiệt của cơ thể, hoạt động phục hồi sau bệnh tật, v.v. , phân tích không chỉ được sử dụng trong miễn dịch học và các bệnh truyền nhiễm, mà còn được sử dụng trong bệnh thấp khớp, ung thư học, phẫu thuật. Kết quả nghiên cứu được hiển thị dưới dạng phần trăm số lượng thực bào hoạt động trên tổng số lượng của chúng. Việc phát hiện bạch cầu trung tính hoạt động và bạch cầu đơn nhân được thực hiện bằng cách sử dụng vi khuẩn có nhãn huỳnh quang. Vật liệu sinh học cho nghiên cứu là máu toàn phần với heparin.
Chỉ định
Nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu được chỉ định cho những trường hợp nghi ngờ suy giảm miễn dịch bẩm sinh hoặc mắc phải. Nó được kê đơn cho các bệnh truyền nhiễm kéo dài, mãn tính và tái phát - một dấu hiệu đặc trưng của việc giảm khả năng miễn dịch. Thông thường, bệnh nhân bị viêm phổi, viêm xoang, viêm tai giữa, viêm ruột, nhiễm nấm Candida, viêm bàng quang được gửi đi phân tích. Ngoài ra, các vết thương lâu ngày không lành và các biến chứng sau khi phẫu thuật có thể cho thấy cơ thể thiếu khả năng bảo vệ miễn dịch. Do đó, phân tích được thực hiện để chuẩn bị cho can thiệp phẫu thuật và với một diễn biến phức tạp của giai đoạn hậu phẫu, với thời gian phục hồi lâu dài sau chấn thương và bỏng. Các chỉ định khác cho nghiên cứu này bao gồm dị ứng, tự miễn dịch và ung thư. Kết quả cho phép chúng tôi đánh giá hoạt động của phòng vệ miễn dịch (thực bào) và vai trò của nó trong sự phát triển của bệnh.
Xét nghiệm máu về hoạt động thực bào của bạch cầu giúp xác định mức độ sẵn sàng thực sự của cơ thể để chống lại nhiễm trùng. Tuy nhiên, cần nhớ rằng chỉ tiêu này thay đổi dưới tác động của nhiều yếu tố. Vì vậy, hoạt động của bạch cầu đơn nhân và bạch cầu trung tính giảm sau khi gắng sức và tinh thần mệt mỏi, và tăng lên sau khi ăn thức ăn nhiều calo. Một hạn chế khác của phân tích là quy trình nghiên cứu kéo dài tới 8 ngày làm việc, kết quả thu được phản ánh tình trạng của một tuần trước.
Chuẩn bị phân tích và lấy mẫu vật liệu
Để nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu, máu được lấy từ tĩnh mạch. Một ngày trước khi phân tích, bạn cần loại trừ rượu khỏi chế độ ăn uống, hủy bỏ việc tập luyện thể thao và các hoạt động thể chất cường độ cao khác, và tránh các tình huống căng thẳng. Cũng cần hỏi ý kiến bác sĩ về ảnh hưởng của các loại thuốc đã dùng đến kết quả xét nghiệm; có thể một số loại thuốc sẽ tạm thời bị hủy bỏ. Lấy mẫu máu thường được thực hiện vào buổi sáng, sau khi nhịn ăn qua đêm, hoặc 4 giờ sau bữa ăn.
Máu được lấy từ tĩnh mạch cubital bằng cách chọc thủng; để nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu, phương pháp đánh giá khả năng thực bào của vi khuẩn bằng nhãn huỳnh quang thường được sử dụng nhất. Tế bào đơn nhân và bạch cầu trung tính, vật liệu thử nghiệm, được phân lập khỏi máu bằng cách ly tâm và rửa. Sau đó, nuôi cấy vi khuẩn phát quang được đưa vào mẫu, hỗn hợp được trộn lại và ủ, và số lượng bạch cầu đã thực bào vi khuẩn được xác định bởi cường độ phát quang. Kết quả phân tích được lập trong vòng 7-8 ngày làm việc. Hoạt động thực bào của bạch cầu đơn nhân và bạch cầu trung tính có thể được xác định bằng các phương pháp khác, ví dụ, bằng cách nhuộm các tế bào bị thực bào (phương pháp Romanovsky-Giemsa), bằng hoạt động của các enzym lysosome, sản xuất cytokine và sự hiện diện của các protein cation.
Giá trị bình thường
Kết quả xét nghiệm máu về hoạt động thực bào của bạch cầu được biểu thị bằng phần trăm số lượng tế bào thực bào từ tổng số của chúng. Các giá trị bình thường đối với bạch cầu hạt là từ 82 đến 90%, đối với bạch cầu đơn nhân - từ 75 đến 85%. Các tỷ lệ này là như nhau đối với bệnh nhân ở mọi lứa tuổi và cả hai giới tính. Sự giảm thực bào sinh lý có thể được xác định trong thời kỳ mang thai, sau khi hoạt động thể chất không tương ứng với mức độ luyện tập và sau khi căng thẳng về tình cảm.
Tăng và giảm chỉ số
Sự gia tăng hoạt động thực bào của bạch cầu không có giá trị chẩn đoán; nhiễm trùng cấp tính có thể là nguyên nhân. Hoạt động của bạch cầu đơn nhân và bạch cầu trung tính tăng lên so với mức ban đầu.
Phân tích hoạt động thực bào của bạch cầu đề cập đến các phương pháp nghiên cứu miễn dịch học. Các chỉ số của nó giúp xác định khả năng dự trữ của các tế bào máu để hấp thụ và tiêu hóa các tác nhân lây nhiễm, tức là mức độ sẵn sàng của cơ thể để chống lại sự phát triển của bệnh. Nếu kết quả xét nghiệm dưới mức bình thường, cần phải tham khảo ý kiến của bác sĩ chuyên khoa - bác sĩ miễn dịch, chuyên gia bệnh truyền nhiễm, bác sĩ phẫu thuật, bác sĩ thấp khớp, bác sĩ chuyên khoa ung thư. Việc giảm các chỉ số sinh lý có thể được điều chỉnh bằng cách lựa chọn đúng các hoạt động thể chất, phòng chống stress.
www.krasotaimedicina.ru
Bác sĩ miễn dịch học-nhà dị ứng Bolibok Vladimir Anatolievich
Kháng thể hoặc globulin miễn dịch. Immunoglobulin là các phân tử protein lớn và phức tạp được tổng hợp bởi các tế bào của hệ thống miễn dịch - tế bào huyết tương. Đổi lại, tế bào huyết tương có nguồn gốc từ tế bào lympho B. Các immunoglobulin có khả năng liên kết với các phân tử lạ (protein, lipoprotein) vừa ở trạng thái hòa tan vừa ở trên bề mặt của virus, vi khuẩn, v.v. Các phân tử lạ cũng có thể được tìm thấy trên màng tế bào của chính chúng nếu các tế bào này bị nhiễm vi rút hoặc bị đột biến. Bản thân các kháng thể không thể tiêu diệt vi rút, vi khuẩn hoặc tế bào, hoặc phá hủy về mặt hóa học một chất độc do vi khuẩn tiết ra. Nhưng trước hết, chúng có thể vô hiệu hóa chúng, phá vỡ chức năng của chúng hoặc loại bỏ độc tính; thứ hai, chúng “chỉ điểm” hệ thống miễn dịch cho một “người lạ” nên bị tiêu diệt. Sau khi các kháng thể phản ứng với các phân tử lạ trên bề mặt của virus, vi khuẩn và các vật thể khác, các protein của hệ thống bổ thể, các tế bào lympho T gây độc tế bào hoặc các tế bào thực bào (bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân - đại thực bào) tham gia vào cuộc chiến với chúng. Đồng thời, sự liên kết của các kháng thể rất chọn lọc - một loại kháng thể chỉ phản ứng với phân tử lạ mà nó được tạo ra. Tính chất này được gọi là tính đặc hiệu của kháng thể. Ví dụ, các kháng thể chống lại vi rút sởi không phản ứng với vi rút varicella-zoster, và ngược lại.
Theo cấu trúc hóa học của chúng, các globulin miễn dịch được chia thành 5 loại:
Globulin miễn dịch loại G. Đây là lớp kháng thể bảo vệ chính, chiếm hơn 80% tổng số kháng thể lưu hành trong máu và môi trường bên trong cơ thể. Các globulin miễn dịch loại G bắt đầu được sản xuất khoảng 7 đến 10 ngày sau lần đầu tiên tiếp xúc với một bệnh nhiễm trùng lạ và mức độ của chúng tăng lên tối đa vào khoảng 30 đến 40 ngày. Các globulin miễn dịch loại G tồn tại trong máu một thời gian dài, đôi khi sự tổng hợp của chúng kéo dài hàng năm và hàng thập kỷ, và chính chúng cung cấp khả năng miễn dịch có được đối với hầu hết các bệnh nhiễm trùng, cả sau khi ốm và sau khi tiêm chủng. Các globulin miễn dịch loại G có thể đi qua nhau thai đến thai nhi đang phát triển và tích tụ trong máu của em bé trước khi sinh. Điều này rất có ý nghĩa, vì đứa trẻ có kháng thể của mẹ cũng có được khả năng miễn dịch chống lại những bệnh nhiễm trùng mà người mẹ tiếp xúc trong môi trường bình thường của trẻ.
Các globulin miễn dịch thuộc lớp M. Đây là những kháng thể lớn nhất, và chúng được tạo ra chủ yếu khi tiếp xúc với một bệnh nhiễm trùng không quen thuộc. Các globulin miễn dịch loại M xuất hiện trong ngày đầu tiên sau khi bắt đầu nhiễm bệnh, mức độ đáng chú ý đã được tạo ra sau 3 - 4 ngày, tối đa - 7 - 10 ngày, và sau đó, sau khi tiêu diệt nhiễm trùng trong cơ thể, chúng nhanh chóng biến mất. - sau khoảng 4 - 6 tuần. Các globulin miễn dịch loại M không qua nhau thai.
Các globulin miễn dịch loại A. Đây được gọi là các kháng thể tiết. Chúng được bài tiết cùng với chất nhầy qua niêm mạc vào đường hô hấp, theo đường tiêu hóa, theo đường lệ trên kết mạc, có mồ hôi và mỡ trên da. Mục đích chính của các globulin miễn dịch loại A là tiêu diệt và ngăn chặn nhiễm trùng trước khi nó có thể tiếp xúc với các mô liên kết của cơ thể và ngăn chặn nhiễm trùng xâm nhập vào cơ thể. Các globulin miễn dịch loại A không qua nhau thai. Các globulin miễn dịch loại A với số lượng đáng kể được bài tiết qua tuyến vú trong sữa mẹ (đặc biệt là nồng độ cao của IgA trong sữa non), và bảo vệ màng nhầy của trẻ sơ sinh và trẻ sơ sinh khỏi bị nhiễm trùng.
Các globulin miễn dịch thuộc lớp D. Nồng độ của các kháng thể này trong máu cũng rất thấp - dưới 1%. Các globulin miễn dịch loại D, không giống như các loại globulin miễn dịch khác, được tổng hợp không phải bởi tế bào plasma mà bởi chính tế bào lympho và là các thụ thể bong vảy từ bề mặt của màng ngoài tế bào lympho, trên thực tế, chúng là các mảnh của màng tế bào lympho đã chết. Ý nghĩa lâm sàng của các globulin miễn dịch này vẫn chưa được làm rõ, vì vậy mức độ của chúng thường không được kiểm tra.
Protein của hệ thống bổ thể.
Các kháng thể hoặc globulin miễn dịch, như đã đề cập ở trên, có thể liên kết với vi rút và vi khuẩn, nhưng không có khả năng tiêu diệt chúng. Khả năng tiêu diệt vi khuẩn, nấm và các tế bào khác nằm trong các protein của hệ thống bổ thể. Trong hệ thống bổ thể, có 9 protein cơ bản và 2 protein bổ sung, tất cả chúng đều có trong máu và sẵn sàng tấn công “kẻ ngoại đạo” ngay sau khi có kháng thể. Các protein này thuộc về protein enzyme, cụ thể là protease. Các protein của hệ thống bổ thể có thể, tương tác với nhau, tập hợp thành một loại "ống" hoặc "kim" xuyên qua lớp vỏ của vi rút, vi khuẩn, hoặc tế bào bị nhiễm hoặc ngoại lai của chính nó ở vị trí chính xác mà kháng thể đã phản ứng. "Kim" này được gọi là "phức hợp tấn công màng". Kết quả là, một lỗ được hình thành trên màng tế bào. Có tính đến thực tế là hơn 10.000 phân tử kháng thể có thể phản ứng đồng thời với một vi khuẩn, cùng một số lượng "lỗ" từ các protein được hình thành đồng thời trong đó. Dưới kính hiển vi điện tử, bề mặt của một tế bào, bị tấn công bởi các kháng thể có bổ thể, trông giống như một cảnh quan mặt trăng, được tạo ra bởi các miệng núi lửa từ các thiên thạch. Vì nồng độ muối bên trong tế bào vi sinh vật cao hơn bên ngoài, nước tràn qua các lỗ trong màng vào tế bào vi sinh vật và vi sinh vật bùng nổ theo nghĩa đen, phồng lên theo nghĩa đen. Quá trình ly giải của vi khuẩn xảy ra, và phần còn lại của nó bị thực bào ăn.
Sự bổ sung là một vũ khí "phản ứng nhanh". Các protein của hệ thống bổ thể phản ứng ngay lập tức ngay khi kháng thể phát hiện ra người ngoài. Điều này rất quan trọng để bảo vệ chống lại nhiễm trùng ở vết thương - nếu hoạt động bổ sung trong cơ thể cao, thì nhiễm trùng xâm nhập vào vết thương sẽ bị tiêu diệt gần như ngay lập tức và vết thương (được bảo vệ khỏi nhiễm trùng thêm với vảy do máu đông) sẽ không mưng mủ.
Lysozyme.
Cơ thể sản sinh ra các enzym đặc biệt có thể làm tan lớp vỏ của vi khuẩn, trong đó được nghiên cứu nhiều nhất là lysozyme (muramylpeptidase). Khi lớp vỏ hòa tan với lysozyme, vi sinh vật sẽ mất đặc tính gây bệnh, không thể xâm nhiễm vào cơ thể sâu hơn và trở thành mục tiêu dễ dàng hơn cho các kháng thể và bổ thể và là “thức ăn” dễ dàng hơn cho thực bào.
Interferon.
Đây là một nhóm protein đặc biệt được sản xuất bởi cả tế bào của hệ thống miễn dịch (bạch cầu) và các tế bào khác của cơ thể, thường là tế bào biểu mô, nếu chúng bị nhiễm bất kỳ loại vi rút nào. Interferon bảo vệ bất kỳ tế bào nào khác trong cơ thể không bị nhiễm vi rút. Nếu không, bất kỳ sự lây nhiễm virus nào cũng sẽ dẫn đến thực tế là tất cả các tế bào của cơ thể đều bị nhiễm bệnh.
Protein phản ứng C.
Protein này có trong máu với một lượng rất nhỏ, nhưng số lượng của nó tăng lên hàng chục và hàng trăm lần khi xuất hiện một ổ viêm do vi khuẩn. Do đó, protein phản ứng C (đọc là C) thuộc loại protein "giai đoạn cấp tính". CRP có khả năng liên kết và "keo" các lớp vỏ của vi khuẩn với nhau: trong quá trình sinh sản, các vi sinh vật vẫn gắn kết với nhau và tạo thành một khối lớn các tế bào vi sinh vật. Thứ nhất, nó ngăn vi khuẩn lây lan qua cơ thể theo dòng máu và bạch huyết. Thứ hai, bên trong một "thuộc địa" vi sinh không nhận được đủ lượng chất dinh dưỡng và sự phát triển và sinh sản của chúng chậm lại hoặc ngừng hoàn toàn. Thứ ba, các tế bào thực bào phản ứng với sự gia tăng hoạt động đối với protein phản ứng C bám trên màng của vi sinh vật và bắt đầu hấp thụ những vi sinh vật này với sự tham lam lớn hơn.
bác sĩ-bolibok.narod.ru
Hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính
Chức năng thực bào của tế bào máu ngoại vi thường được đánh giá bằng tỷ lệ phần trăm bạch cầu trung tính thực bào, số lượng thực bào (số lượng trung bình vi sinh vật bị một bạch cầu hạt bắt giữ) và chỉ số thực bào tuyệt đối, là một giá trị trừu tượng thu được do nhân thực bào. số lượng bằng số lượng bạch cầu trung tính thực bào trong 1 mm3 máu. Nói cách khác, chỉ số thực bào tuyệt đối là số lượng vi khuẩn có khả năng hấp thụ bạch cầu trung tính có trong 1 mm3 máu. Khi diễn ra các phản ứng thực bào, một huyền phù của vi sinh vật bị giết và máu của bệnh nhân được sử dụng. Sau khi ủ máu và vi khuẩn trong máy điều nhiệt, phết tế bào được chuẩn bị, nhuộm màu, đánh giá khả năng hấp thụ của bạch cầu hạt.
Để tổ chức phản ứng thực bào, một huyền phù của vi sinh vật sống cũng được sử dụng. Trong những trường hợp này, hoạt động thực bào của bạch cầu hạt sẽ thấp hơn từ 2 - 2; 5 lần so với phản ứng với vi khuẩn bị tiêu diệt. Đặc tính hình thành Rosette của bạch cầu trung tính. Trong những năm gần đây, người ta nhận thấy rằng bạch cầu trung tính ở người có các thụ thể trên bề mặt màng của chúng đối với một số thành phần bổ thể và các đoạn Fc của các globulin miễn dịch. Sự hiện diện của các thụ thể cho hồng cầu ram trên màng của bạch cầu trung tính cũng được thiết lập.
Giống như tế bào lympho, bạch cầu trung tính có thể được chia thành các quần thể tùy theo khả năng tự tạo hình hoa thị với hồng cầu cừu và bổ sung cho hồng cầu với hồng cầu toàn thể khi có mặt của bổ thể và globulin miễn dịch.
Giai đoạn của các phản ứng hình thành hình hoa thị tự phát và bổ sung của bạch cầu trung tính tương tự như giai đoạn của các phản ứng hình thành hình hoa thị tự phát và bổ sung của tế bào lympho. Hoạt động bổ sung của huyết thanh. Các thành phần bổ thể trơ về mặt sinh học, nhưng khi được kích hoạt bởi phức hợp kháng nguyên-kháng thể, chúng có được các đặc tính của các enzym và đóng một vai trò rõ rệt (bảo vệ hoặc phá hủy) trong quá trình phân giải tế bào miễn dịch. Ngoài sự phân giải tế bào, bổ thể trực tiếp tham gia vào các biểu hiện khác nhau của quá trình bảo vệ không đặc hiệu của cơ thể và chủ yếu trong các giai đoạn khác nhau của phản ứng viêm, cả tế bào và thể dịch.
Trong số các biểu hiện này, được nghiên cứu nhiều nhất là hoạt động của bổ thể, dẫn đến giải phóng histamine và tăng tính thấm mao mạch, kiểm soát hóa chất điều hòa và tăng khả năng thực bào của bạch cầu hạt trung tính, thúc đẩy sự kết dính miễn dịch và làm đục các hạt thực bào, phá vỡ tế bào. tường, v.v.
Bằng cách tăng tính thấm của các mạch máu nhỏ, bổ thể dường như tham gia vào việc quản lý sự di chuyển của bạch cầu hạt.
Hệ thống bổ thể được đại diện bởi các phân tử protein khu trú trong các phân đoạn alpha và beta globulin và bao gồm 11 protein huyết thanh, tạo nên 9 thành phần.
Để kích hoạt hệ thống bổ thể, cần có các chất đặc biệt, do đó các thành phần bổ thể hoạt hóa lẫn nhau theo một trình tự nghiêm ngặt (hoạt hóa theo dòng hoặc tuần tự) theo hai cách - cổ điển và thay thế (hoặc thích hợp).
Sự hoạt hóa theo con đường cổ điển là do phức hợp kháng nguyên-kháng thể, được kết hợp bởi các globulin miễn dịch loại G và M, hoặc bởi phức hợp polyanion-polycation, chẳng hạn như phức hợp heparin-protamine. Trong trường hợp này, thành phần bổ thể thứ nhất (C1) tạo thành C1-esterase, phân cắt thành phần bổ thể thứ tư (C4) và thứ hai (C2), thúc đẩy sự hình thành C3-convertase của con đường cổ điển.
Một con đường thay thế để kích hoạt bổ thể cổ hơn về mặt tiến hóa. Nó quan trọng nhất trong cơ chế bảo vệ kháng khuẩn trước khi các kháng thể cụ thể được tạo ra. Sự hoạt hóa bằng một con đường thay thế được gây ra bởi các globulin miễn dịch tập hợp của các lớp A và E, các polysaccharid hòa tan và không hòa tan của vỏ vi khuẩn và không yêu cầu sự hiện diện của các thành phần bổ thể C1-, C4- và C2.
Trong giai đoạn đầu tiên, một enzym được hình thành trên bề mặt của chất hoạt hóa là kết quả của sự tương tác của các yếu tố của thành phần C3. Enzyme này rất bền, nhưng nó có khả năng phân cắt C3 và do đó góp phần hình thành một convertase C3 hiệu quả hơn. Sự hình thành SZ-convertase và sự phân cắt của thành phần bổ thể thứ ba dưới ảnh hưởng của nó là những thời điểm quan trọng của cả hai con đường hoạt hóa.
Ở giai đoạn này, các tương tác tế bào phụ thuộc vào bổ thể diễn ra. Cái gọi là cầu nối bổ sung có liên quan đến việc cảm ứng các phản ứng miễn dịch, loại bỏ các phức hợp miễn dịch và kiểm soát nhiễm trùng do vi khuẩn. Sự hình thành các cầu nối như vậy từ lâu đã được gọi là sự kết dính miễn dịch.
Hiện tượng này được sử dụng trong thử nghiệm hoa thị bổ sung. Cả hai con đường hoạt hóa bổ thể đều dẫn đến việc tạo ra các mảnh có hoạt tính sinh học của các thành phần bổ thể. Do đó, hệ thống bổ thể được kích hoạt bởi các tác nhân liên tục hiện diện trong một cơ thể hoạt động bình thường.
Trong quá trình tiến hóa, các cơ chế kiểm soát sự kích hoạt của nó cũng đã phát triển. Có hai cơ chế chính để điều chỉnh hoạt hóa bổ thể. Đầu tiên là vốn có trong bản thân hệ thống và bao gồm tính không bền của C3-convertase của cả hai con đường, điều này hạn chế sự hoạt hóa của các thành phần bổ thể tiếp theo tham gia vào quá trình hoạt hóa theo dòng (C5 - C9).
Thứ hai được thực hiện bởi các protein ức chế tự nhiên đặc biệt. Trong số này, chất quan trọng nhất là chất ức chế C1, tạo phức với đoạn C2, ngăn nó phân cắt thêm C4 và C2, và do đó điều khiển sự lắp ráp của C3 convertase của con đường cổ điển, và chất khử hoạt tính C3, phục vụ là protein kiểm soát chính của hệ thống bổ thể, phân cắt C3. trong pha lỏng thành hai protein bất hoạt huyết tán.
Có bằng chứng về những thay đổi trong hệ thống bổ thể trong các tình trạng bệnh lý khác nhau. Vì vậy, Kassel (1977) đã xác định sự thiếu hụt bổ sung và các thành phần của nó ở hơn 5000 bệnh nhân ung thư thuộc nhiều địa phương khác nhau.
Các thành phần riêng biệt của bổ thể huyết thanh thường được xác định bằng phương pháp khuếch tán miễn dịch xuyên tâm theo Mancini sử dụng kháng huyết thanh đơn đặc hiệu cho một hoặc một thành phần khác. Hoạt động bổ sung cũng được đánh giá bằng khả năng làm đông cứng các tế bào hồng cầu khi có các kháng thể chống lại chúng.
Đơn vị hoạt động tán huyết của bổ thể được coi là hoạt động cần thiết để ly giải 50% hồng cầu khi có kháng thể. Sử dụng phương pháp chuẩn độ động học, phản ứng có thể được ghi lại theo thời gian. Phản ứng này là định tính và không cho biết nồng độ của bổ thể và các thành phần của nó.
"Điều chỉnh khả năng miễn dịch ở bệnh nhân ung thư
tuyến tiền liệt ", V. A. Savinov
www.medchitalka.ru
Hoạt động thực bào của bạch cầu máu ngoại vi ở các loài động vật khác nhau
ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÀNH GIÁ DỊCH VỤ THÚ Y KHI PHỤC VỤ CÁC VẬT NUÔI NHỎ
Trofimova E.N.
Việc tính đến đặc thù của việc hình thành giá dịch vụ thú y khi chăm sóc vật nuôi nhỏ để đảm bảo việc thiết lập giá có căn cứ khoa học được sử dụng trong hành nghề thú y.
ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÀNH BÁO GIÁ TRÊN DỊCH VỤ THÚ Y TẠI
DỊCH VỤ CỦA CÁC VẬT NUÔI NHỎ
Bản tường trình về các đặc điểm hình thành các trích dẫn về dịch vụ thú y phục vụ các vật nuôi nhỏ cung cấp một cơ sở trích dẫn một cách khoa học - có cơ sở được sử dụng trong thực hành thú y.
UDC 619: 616 - 002.5
HOẠT ĐỘNG PHẠM VI CỦA CÁC LEUKOCYTES KHOÁNG SẢN Ở CÁC LOÀI ĐỘNG VẬT KHÁC NHAU
A.I. Trubkin và M.V. Kharitonov
FGOU HPE ”Học viện Thú y Bang Kazan được đặt tên theo N.E. Bauman "
Từ khóa: mycobacterium, chủng, hoạt động thực bào.
Từ khóa: mycobacterium, chủng, hoạt động thực bào.
Máu là một trong những chỉ số tinh tế và nhạy cảm nhất cho biết trạng thái chức năng của cơ thể, phản ánh bức tranh về cuộc đấu tranh của nó với vi sinh vật xâm nhập, giun sán và khả năng phản ứng của nó. Được phát triển bởi I.I. Mechnikov, lý thuyết về vai trò bảo vệ của thực bào trong cuộc chiến của cơ thể chống lại các vi khuẩn gây bệnh đã xâm nhập vào mô của nó là bước đầu tiên hướng tới việc xây dựng lý thuyết về miễn dịch chống lây nhiễm. Theo các nguồn tài liệu, hiện tượng thực bào trong nhiễm trùng lao có tính chất bảo vệ không đặc hiệu. Tuy nhiên, có một số quan sát chỉ ra rằng vẫn có một số mức độ đặc hiệu trong phản ứng thực bào ở bệnh lao. Ví dụ,
ĐỊA NGỤC. Timofeevsky, S.V. Belevolenskaya (1927), G. D. Belanovsky (1928) đã chỉ ra rằng các tế bào thực bào của dịch tiết phúc mạc, máu ngoại vi, lá lách và phổi của động vật được miễn dịch và kháng tự nhiên không bị tiêu diệt khi có mycobacteria độc lực, mà ngược lại, ngăn chặn sự sinh sản của chúng.
Phức tạp hơn nữa là câu hỏi về số phận của bản thân vi khuẩn lao, chúng xâm nhập vào cơ thể và phản ứng mà chúng gây ra trong các cơ quan. Theo các nguồn tài liệu (A.S. Rabukhin, 1941; Yu.A. Lebedeva, S.M. Sazhina, 1913, v.v.) khi nuôi cấy vi khuẩn lao có độc lực, hiện tượng tăng bạch cầu trung tính và sự thực bào của vi khuẩn lao bởi bạch cầu đa nhân trung tính xảy ra đầu tiên, sau đó là hoại tử bạch cầu, chứa đầy mầm bệnh. Đồng thời, bạch cầu từ những bệnh nhân bị bệnh phổi không đặc hiệu, với một dạng bệnh lao hạn chế, trong trường hợp nhiễm với liều lượng nhỏ trực khuẩn lao, chúng sẽ tăng chuyển đổi thành nguyên bào lympho. Đồng thời, bạch cầu của những người bị bệnh lao mãn tính hoặc cấp tính bị phân hủy nhanh chóng.
Về vấn đề này, một nghiên cứu so sánh về hoạt động thực bào của bạch cầu máu ngoại vi ở các loài động vật khác nhau, bao gồm cả lợn guinea và thỏ, đã khơi dậy sự quan tâm nhất định.
Nguyên liệu và phương pháp. Chúng tôi đã sử dụng bạch cầu máu ngoại vi của động vật khỏe mạnh: gia súc, ngựa, cừu, dê, chó, thỏ, chuột lang và chuột cống trắng.
Để ngăn ngừa đông máu, nó đã được gan hóa với tỷ lệ 4 đơn vị. tiêm heparin trên 1 ml máu. Sau khi trộn sơ bộ, các ống với máu được để ở góc 100 ở nhiệt độ phòng trong 1 giờ. Sau đó, các ống này được đặt ở góc 450 trong 15-20 phút. trong trường hợp này, số lượng bạch cầu cần thiết để thiết lập thí nghiệm được tích lũy giữa hồng cầu và huyết tương dưới dạng sương mù. Các bạch cầu tích lũy được hút và đưa vào lọ chứa 5 ml môi trường 199. Sau khi khuấy nhẹ hỗn hợp thu được, chủng M. bovis N14 của quá trình nuôi cấy vi khuẩn mycobacteria được thêm vào lọ ở độ đục tiêu chuẩn là 1 mg trong 1 ml dung dịch muối.
Các lọ được đậy bằng nút cao su và sau khi khuấy nhẹ, chúng được đặt ở vị trí thẳng đứng trong bình điều nhiệt ở nhiệt độ 370C.
Ban đầu, cứ sau 15 phút. (15,30,45,60,75,90,105,120 phút), và sau đó sau 3,4,5,6,24,48 và 72 giờ kể từ thời điểm ủ, vết bẩn được tạo ra bằng cách sử dụng thủy tinh được chế tạo đặc biệt cho mục đích này tại một góc 200. Các kim loại được cố định trong dung dịch bão hòa thủy ngân clorua trong 2-3 phút. và nhuộm bằng fuchsin carbol của Tsil, khử màu bằng dung dịch axit sulfuric 2,5%. Để hòa tan các tế bào hồng cầu bổ sung
Xử lý bằng dung dịch axit axetic và tạo màu bổ sung bằng dung dịch xanh metylen 0,5% trộn với dung dịch xút 0,5%.
Chúng tôi đếm được 100 bạch cầu đa nhân trung tính, 50 đơn vị từ mỗi cạnh của phết tế bào và hiển thị hoạt động thực bào của bạch cầu theo phần trăm.
Chỉ số thực bào được xác định như sau, đếm số lượng trực khuẩn lao thực bào trong 100 bạch cầu và lấy số lượng kết quả chia cho số lượng bạch cầu xét nghiệm.
Kết quả nghiên cứu. Nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu máu ngoại vi ở các loài động vật khác nhau liên quan đến việc nuôi cấy độc lực của mycobacterium tuberculosis bò cho thấy rằng trong 15 phút đầu tiên. sau sự tiếp xúc của bạch cầu sẽ xảy ra sự tích tụ các cơ thể vi sinh vật xung quanh các tế bào máu bị thực bào (lực hút), nhưng sự hấp thụ của các cơ thể vi sinh vật vẫn chưa được quan sát thấy. Sau 30 phút, sau khi đưa mycobacteria vào, sự gia tăng hoạt động thực bào của bạch cầu liên quan đến mycobacteria đã được tìm thấy ở tất cả các loài động vật. Có thể thấy ở bảng 1, trong 30 phút đầu tiên. bạch cầu chuột trắng thể hiện hoạt động thực bào đáng kể (9,2 ± 2,03%; P
Ở động vật sản xuất, hoạt động thực bào cao của bạch cầu được quan sát thấy ở dê 6,2 ± 2,10% (P
Đồng thời với hoạt động thực bào của bạch cầu, chỉ số thực bào, số lượng vi khuẩn thực bào trong 100 bạch cầu, đã được nghiên cứu. Dữ liệu cho thấy số lượng mycobacteria hấp thụ trung bình trên mỗi tế bào thực bào được trình bày trong Bảng 2. Hơn nữa, để tính đến cường độ của quá trình thực bào, tất cả các bạch cầu được thực bào được chia thành ba nhóm: nhóm thứ nhất bao gồm các tế bào chứa từ 1 đến 10 mycobacteria; trong trường hợp của chúng tôi, các ô như vậy chiếm 80%; trong thứ hai, từ 10 đến 20, các ô như vậy chiếm 15%; ở vi khuẩn thứ ba - trên 20 mycobacteria, những tế bào như vậy chiếm 5% tổng số tế bào được đếm.
Như có thể thấy trong bảng, chỉ số thực bào ban đầu liên quan đến việc nuôi cấy độc lực của vi khuẩn mycobacteria ở bò ở tất cả các động vật đều thấp hơn một.
* 15 30 45 60 75 90 105 120 3 giờ 4 giờ 5 giờ 6 giờ 24 giờ 48 giờ 72 giờ
1. Ngựa 3 6,8 ± 1,62 3,5 ± 0,95 4,3 ± 1,10 5,8 ± 1,31 6,4 ± 1,68 8,7 ± 1,62 10,0 ± 2,71 18,5 ± 4,00 25,0 ± 3,10 28,6 ± 3,80 30,0 ± 3,22 39,0 ± 3,50 43,9 ± 7,72 48,4 ± 6, 20 48,7 ± 5,20
2. Cr. sừng. chăn nuôi 3 5,0 ± 1,03 3,4 ± 0,93 4,8 ± 1,19 5,8 ± 1,14 5,8 ± 1,39 7,4 ± 2,31 12,2 ± 2,96 19,0 ± 3,43 26,1 ± 3,31 27,6 ± 5,19 38,8 ± 6,05 40,0 ± 6,15 41,6 ± 8,07 43,0 ± 8,11 43,2 ± 5,08
3.She 3 5,6 ± 1,11 0,05 4,8 ± 1,05 0,05 6,2 ± 1,21 9,2 ± 2,05 12,4 ± 3,63 15,8 ± 2,33 19,8 ± 2,91 24,2 ± 3,81 30,0 ± 4,01 33,8 ± 4,17 38,8 ± 5,26 40,0 ± 4,15 44,8 ± 5, 17 49,6 ± 5,09 51,8 ± 7,11
4. Dê 3 6,4 ± 2,09 6,2 ± 2,10 7,8 ± 2,20 9,2 ± 2,81 11,0 ± 2,33 19,4 ± 3,17 23,0 ± 3,19 25,4 ± 4,21 35,8 ± 6,15 37,0 ± 5,11 40,0 ± 5,08 44,4 ± 5,19 52,0 ± 7,01 55,6 ± 7,12 60,4 ± 7,07
5.Dog 3 6,6 ± 1,15 7,8 ± 2,03 9,2 ± 2,97 12,0 ± 3,53 12,8 ± 3,31 19,8 ± 3,03 26,1 ± 3,95 31,0 ± 3,91 38,4 ± 5,05 38,2 ± 4,17 40,4 ± 6,09 43,2 ± 6,12 49,5 ± 7,05 55,8 ± 8,11 67,0 ± 8.19
6. Thỏ 3 4,3 ± 1,90 2,8 ± 0,9 3,1 ± 1,01 3,8 ± 1,56 3,9 ± 1,65 5,0 ± 1,68 5,4 ± 1,35 7,4 ± 2,06 7,8 ± 2,11 9,0 ± 2,19 12,6 ± 2,51 17,8 ± 3,19 0,05 24,4 ± 4,11 0,05 27,0 ± 4,92 31,0 ± 5,15 0,05
7.M. quai bị 3 2,6 ± 1,07 1,2 ± 0,32 1,5 ± 0,95 2,0 ± 1,04 2,2 ± 1,00 2,8 ± 1,04 3,4 ± 1,17 3,8 ± 1,23 4,1 ± 1,92 5,0 ± 2,00 5,6 ± 1,92 6,3 ± 2,03 11,8 ± 3,09 13,2 ± 3,19 17,2 ± 4,05
8. Chuột trắng 3 8,1 ± 1,35 9,2 ± 2,03 13,0 ± 2,20 19,6 ± 3,35 27,6 ± 5,49 31,6 ± 5,82 37,4 ± 6,05 43,8 ± 6,11 56,6 ± 7,14 59,8 ± 8,07 65,0 ± 8,15 72,3 ± 8,03 84,4 ± 8,15 87,0 ± 9,07 87,6 ± 9,19
* - sự thu hút của vi khuẩn mycobacteria trên bề mặt của bạch cầu
Mục STT Loại động vật sau khi tiếp xúc với mầm bệnh thông qua:
15 30 45 60 75 90 105 120 3 giờ 4 giờ 4 giờ 5 giờ 6 giờ 24 giờ 48 giờ 72 giờ
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
1. Ngựa 3 - 0,9 ± 0,03 1,78 ± 0,86 2,82 ± 1,25 3,13 ± 1,08 3,3 ± 1,01 3,9 ± 1,10 4,07 ± 1,51 5,32 ± 1,58 5,4 ± 1,96 5,95 ± 1,05 5,96 ± 1,14 6,8 ± 1,6 8,1 ± 2,90 8,2 ± 1,70
2. Cr. sừng. vật nuôi 3 - 0,9 ± 0,02 1,5 ± 0,51 2,0 ± 0,52 2,2 ± 0,91 2,8 ± 0,85 3,1 ± 1,05 3,6 ± 1,21 4,0 ± 1,65 4,8 ± 1,12 5,2 ± 2,01 5,6 ± 2,12 5,4 ± 1,36 5,6 ± 2,05 5,6 ± 2,17
3. Cừu 3 - 0,8 ± 0,02 1,8 ± 0,30 2,3 ± 0,15 2,8 ± 0,65 3,3 ± 1,02 4,4 ± 1,65 5,8 ± 2,01 5,8 ± 2,11 6,4 ± 3,03 6,0 ± 3,05 6,2 ± 3,18 6,0 ± 2,31 6,8 ± 2,15 6,8 ± 3,11
4. Dê 3 - 0,8 ± 0,11 1,7 ± 0,20 2,1 ± 0,80 2,3 ± 0,7 3,8 ± 1,05 4,0 ± 2,11 4,4 ± 2,01 5,1 ± 2,03 6,4 ± 2,11 6,8 ± 2,19 6,8 ± 2,35 7,6 ± 3,05 7,8 ± 3,12 7,8 ± 3,11
5.Dog 3 0,2 ± 0,01 0,8 ± 0,05 1,7 ± 0,15 2,3 ± 0,17 3,01 ± 1,01 4,5 ± 1,17 5,9 ± 1,19 6,5 ± 2,05 7,2 ± 2,01 7,5 ± 2,10 7,8 ± 2,05 8,7 ± 3,15 9,5 ± 3,05 9,9 ± 3,41 10,1 ± 3, mười một
6. Thỏ 3 0,3 ± 0,02 1,9 ± 0,3 1,9 ± 0,61 1,3 ± 0,85 2,0 ± 0,90 2,1 ± 0,80 2,6 ± 0,31 2,9 ± 0,68 2,9 ± 0,35 3,0 ± 1,05 3,0 ± 1,01 3,8 ± 1,15 3,9 ± 1,12 3,9 ± 1,05
Bệnh quai bị 7 tháng 3 - 0,1 ± 0,01 1,2 ± 0,3 1,6 ± 0,03 1,9 ± 0,2 1,1 ± 0,30 1,3 ± 0,9 1,3 ± 0,12 1,8 ± 0,75 1,9 ± 0,90 1,9 ± 0,85 2,0 ± 0,64 2,6 ± 1,01 2,6 ± 1,00 2, 7 ± 0,45
8. Chuột trắng 3 0,3 ± 0,1 0,9 ± 0,05 1,0 ± 0,04 2,8 ± 0,31 3,6 ± 1,15 5,3 ± 1,36 6,8 ± 2,02 7,5 ± 2,33 8,8 ± 2,14 9,0 ± 3,00 9,2 ± 3,06 9,1 ± 2,95 9,9 ± 2,12 10,0 ± 3,01 10 .3 ± 3.05
Khi giai đoạn nuôi cấy tế bào tiến triển, chỉ số thực bào là có ý nghĩa (P
HOẠT ĐỘNG TỪ VỰNG CỦA CÁC NEUTROPHIL TRONG MÁU CỦA CON NGƯỜI TRONG CÁC PHƯƠNG TIỆN GIẢM THUYẾT TRONG VIỆC TRÌNH BÀY KHÁNG SINH
HOẠT ĐỘNG DƯỢC LỰC HỌC CỦA NEUTROPHILS CỦA MÁU CON NGƯỜI TRONG VỪA GIẢ THUYẾT BẰNG HÀNH ĐỘNG KHÁNG SINH
A.A. Mishchenko, E.M. Savelieva
A.A. Mischenko, E.M. Savelyeva
Hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính trong máu người được nghiên cứu trong môi trường nhược trương và có mặt một số loại kháng sinh. Giảm trương lực 1,5-2,0 lần làm tăng các thông số thực bào lên 16%. Khi có mặt của furosemide, tác dụng hạ huyết áp không được biểu hiện. Nhiều loại kháng sinh gây ức chế mạnh quá trình thực bào.
Phản ứng thực bào của bạch cầu trung tính người trong môi trường nhược trương và khi có kháng sinh đã được nghiên cứu. Giảm trương lực của môi trường từ 1,5 - 2 lần làm tăng các chỉ số thực bào trên 16%. Ở sự hiện diện furosemide, hoạt động của một giảm trương lực không được hiển thị. Nhiều loại kháng sinh gây ức chế mạnh quá trình thực bào.
Từ khóa: bạch cầu trung tính, thực bào, hoạt động thực bào, hạ huyết áp.
Từ khóa: bạch cầu trung tính, thực bào, hoạt động thực bào, nhược điểm.
Giới thiệu
Rào cản chính đối với sự xâm nhập của nhiễm trùng vào cơ thể là màng nhầy. Là hệ thống đa thành phần, chúng tham gia vào nhiều phản ứng của cơ thể, bao gồm cả những phản ứng miễn dịch. Bình thường, màng nhầy chứa các globulin miễn dịch và một lượng nhỏ bạch cầu trung tính và đại thực bào. Chính những tế bào này là tế bào đầu tiên tiếp xúc với mầm bệnh, nhưng trong trường hợp xâm nhập của tế bào thứ hai vào độ dày của mô, sự tích tụ của lympho trong độ dày của màng nhầy sẽ trở thành một rào cản.
Vì các bề mặt của màng nhầy không đẳng trương với huyết tương, để đánh giá hoạt động của các tế bào của hệ thống miễn dịch trong những điều kiện như vậy, nên thực hiện các thí nghiệm trong môi trường dị đẳng trong ống nghiệm. Vì vậy, người ta đã chỉ ra rằng trong các dung dịch giảm trương lực trong bạch cầu, một sự bùng nổ oxy được kích hoạt, sự chuyển hóa của axit arachidonic và nồng độ của các ion canxi tăng lên. Trong công việc của mình, chúng tôi đã nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính trong máu khi mô phỏng các điều kiện giảm trương lực. Vì trong trường hợp cơ thể xảy ra quá trình viêm, bác sĩ thường kê đơn liệu pháp kháng sinh, nên tác động của các loại kháng sinh khác nhau lên hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính trong máu cũng đã được nghiên cứu.
Đối tượng và phương pháp
Trong các thí nghiệm, chúng tôi sử dụng máu tĩnh mạch từ những người hiến tặng nam giới, lấy từ Trạm Truyền máu của Đảng Cộng hòa (Syktyvkar). 500 μl máu được cho vào các giếng của đĩa để thực hiện các phản ứng miễn dịch học. Một huyền phù tế bào nấm men (OOO Saf-Neva), trước đó đã rửa ba lần bằng dung dịch NaCl 0,9%, được thêm vào mỗi giếng. Số lượng tế bào nấm men trung bình là 30 nghìn / 1 μl máu.
Nước cất (pH 7,4) được thêm vào giếng để giảm trương lực theo hệ số 2,0 và 1,5. Trong một số thí nghiệm, furosemide cũng được thêm vào giếng với môi trường iso- và hyponic ở nồng độ 1 * 10-5 mol / l.
Trong các thí nghiệm với kháng sinh, lincomycin, ceftriaxone, amoxiclav và gentamicin được thêm vào giếng ở nồng độ 30 mg / l.
Các mẫu được ủ trong máy điều nhiệt ở 370C trong 20 phút. Sau đó, đĩa được đặt trên nước đá để ngăn phản ứng thực bào, và 3 mẫu phết được chuẩn bị từ mỗi giếng. Sau khi làm khô và cố định, các vết bẩn được nhuộm theo Giemsa-Romanovsky, được xem dưới kính hiển vi ở độ phóng đại ngâm nước 15 * 90.
Chúng tôi đã đếm: 1) hoạt động thực bào - số lượng bạch cầu trung tính hoạt động trong số 100 được gặp trong quá trình xem; 2) chỉ số thực bào - số lượng trung bình của tế bào nấm men được một bạch cầu trung tính hấp thụ. Kết quả được xử lý bằng phương pháp so sánh theo cặp; ý nghĩa của sự khác biệt giữa các mẫu được đánh giá bằng thử nghiệm Wilcoxon.
kết quả và thảo luận
Trong đối chứng, hoạt tính thực bào của bạch cầu máu người là 49,5 ± 5%, chỉ số thực bào là 1,64 ± 0,1 (n = 20). Dữ liệu phù hợp với kết quả thu được trong nghiên cứu khả năng thực bào của nấm Candida crusei gây bệnh. Hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính trong những điều kiện này được kích thích bởi P-glucans trong thành tế bào nấm men, nơi có các thụ thể trên bề mặt của tế bào thực bào, cũng như bởi tác dụng gây opêron của các thành phần hệ thống bổ thể C3bi và các globulin miễn dịch IgG có trong máu huyết tương.
Với sự giảm trương lực của môi trường 1,5 và 2,0 lần (n = 20), hoạt động thực bào tăng trung bình 16,5%, lên tới 58,1 ± 9,1% (p<0.05). Увеличился также фагоцитарный индекс до 1.97±0.06 и 2.14±0.58 при снижении тоничности в 1.5 и 2.0 раза соответственно. Таким образом, гипотония вызвала активацию фагоцитоза, что отразилось в увеличении как доли активных клеток, так и скорости поглощения фагоцитами дрожжей. Одним из механизмов такого
hành động của hạ huyết áp có thể là sự gia tăng nồng độ canxi nội bào, dẫn đến những thay đổi trong bộ xương của tế bào, khả năng di chuyển và hoạt động thực bào của chúng. Ngoài ra, hoạt động của tế bào trong những điều kiện này có thể bị thay đổi bằng cách kích hoạt sự giảm thể tích theo quy định, RVD, để phản ứng với sự sưng tấy của tế bào. Để loại trừ ảnh hưởng của chất thứ hai, ức chế K +, Cl "- đồng vận chuyển bởi furosemide, sự hoạt hóa dẫn đến RVD. Vì chất này làm thay đổi hoạt tính hóa học của tế bào, tác dụng của nó trong môi trường đẳng trương đã được nghiên cứu trước đây. Đồng thời, furosemide không thay đổi hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính (n = 20 Trong môi trường nhược trương, furosemide không thay đổi hoạt động thực bào so với đối chứng và giảm hoạt động thực bào so với kết quả trong môi trường nhược trương trong sự vắng mặt của chất (p<0.05). В частности, в присутствии фуросемида фагоцитарная активность и фагоцитарный индекс составили 45.9±6.7%; 1.83±0.1 и 50.5±5.6%; 1.7±0.1 соответственно при
hạ huyết áp 1,5 và 2,0. Do đó, bằng cách ngăn chặn phản ứng RVD, furosemide do đó ngăn chặn sự hoạt hóa tế bào trong điều kiện hạ huyết áp.
Dưới ảnh hưởng của kháng sinh, các chỉ số về hoạt động thực bào giảm. Dưới tác dụng của ceftriaxone, hoạt động thực bào giảm 78% đến 10 ± 2,3% (p<0.02), амоксиклав - на 70% до 17±3.9% (р<0.02), линкомицин - на 65% до 16±4.9% (р<0.02), гентамицин - на 76% до 11±3.6% (р<0.02). Фагоцитарный индекс в экспериментах с антибиотиками практически оставался неизменным, следовательно, данные препараты не влияют на скорость поглощения клеток.
Sự gia tăng hoạt động thực bào dưới ảnh hưởng của thuốc kháng sinh đã được ghi nhận trong một số công trình. Theo các dữ liệu khác, hoạt động thực bào của bạch cầu bị ức chế bởi thuốc kháng sinh như aureomycin. Oxytracycline, erythromycin, chloramphenicol, polymyxin B không gây ra những thay đổi đáng chú ý trong hoạt động thực bào của bạch cầu.
Thuốc kháng sinh được sử dụng trong các thí nghiệm thuộc các nhóm khác nhau tùy theo tác dụng của chúng. Amoxiclav và ceftriaxone hoạt động như một loại thuốc diệt khuẩn (ức chế sự phát triển của thành tế bào và ngăn chặn sự tổng hợp peptidoglycan, murein, đặc hiệu cho thành tế bào vi khuẩn). Lincomycin và gentamicin ở nồng độ thấp có tác dụng kìm khuẩn và diệt khuẩn - khi nồng độ tăng lên (ức chế tổng hợp protein bằng cách liên kết với các tiểu đơn vị ribosome ở tuổi 50 và 30). Tất cả các loại thuốc kháng sinh trong các thí nghiệm của chúng tôi đều có tác dụng ức chế bạch cầu trung tính. Điều này có thể do thay đổi cấu trúc
thuốc kháng khuẩn do các quá trình trao đổi chất trong cơ thể, do đó các sản phẩm chuyển hóa trở nên độc hại đối với
chính các tế bào thực bào. Thuốc kháng sinh là một trong những nguyên nhân chính gây giảm bạch cầu và mất bạch cầu hạt. Tác dụng này được tạo ra bởi các penicilin, cephalosporin và sulfonamit. Gentamicin aminoglycoside làm tăng sự hình thành các lysosome có chứa các yếu tố độc lực khác nhau. Các đại diện của kháng sinh P-lactam, amoxiclav và ceftriaxone, có thể ngăn chặn phản ứng bùng nổ oxy hóa.
Dữ liệu về tác dụng của lincosamines, mà lincomycin được sử dụng, đối với hoạt động thực bào là mâu thuẫn. Ở các nồng độ khác nhau của thuốc, các tác giả ghi nhận cả sự gia tăng hoạt động thực bào và giảm hoặc không thay đổi. Có thể nồng độ thuốc kháng sinh được sử dụng trong các thí nghiệm của chúng tôi đã gây độc cho tế bào.
1. Trong đối chứng, hoạt động thực bào và chỉ số thực bào lần lượt là 49,5 ± 5% và 1,64 ± 0,1.
2. Thay thế môi trường đẳng trương bằng môi trường nhược trương làm tăng cả hoạt động thực bào và chỉ số thực bào lên lần lượt là 16,5% và 1,5-2 lần.
3. Khi có mặt furosemide, tác dụng hạ huyết áp đối với hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính không được biểu hiện.
4. Các kháng sinh ceftriaxone, amoxiclav, lincomycin và gentamicin ức chế hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính lần lượt là 78%, 76%, 65% và 70%.
1. Aleshina E.N. Nghiên cứu tác động của các penicilin vô định hình và tinh thể đối với vi khuẩn gây bệnh dịch hạch // Tr. Rostov-on-Don PSI. Rostov-on-Don, 1959. T. 15. Số phát hành. 1.S 153-160.
2. Arefieva N.A., Aznabaeva L.F. Phản ứng miễn dịch của niêm mạc mũi: chẩn đoán tế bào học, phương pháp điều trị // Consilium Medicum. 2009. T. 11. số 11. S. 30-33.
3. Izraelson M.I., Shpolyansky B.I., Boevskaya G.I. Ảnh hưởng của penicillin đến khả năng hoạt động của hệ thống lưới nội mô và hoạt động thực bào của bạch cầu // Zh. micr. gây tê. và nonun. Năm 1951. Số 3. S. 59-62.
4. Lakin G.F. Sinh trắc học. M .: Cao hơn. trường học, 1980.291 tr.
5. Finkel E.A., Lutskaya S.I. Autovaccinotherapy cho bệnh lao: Chuyên khảo. Kyrgyzstan, 1972.154 tr.
6. Bazzoni F., Cassatella M.A., Laudanna C., Rossi F. Thực bào yếu tố hoại tử khối u của nấm men opso hóa - tích lũy alpha mRNA và giải phóng protein bởi bạch cầu đa nhân ở người // J. Leukoc. Biol. 1991. V. 50. Số 3. P. 223-228.
7. Czop J.K., Valiante N.H., Janusz M.J. Sự thực bào của các chất hoạt hóa dạng hạt của con đường bổ thể thay thế ở người cho rằng các thụ thể beta-glucan monocyte // Prog. Biol. Res. Năm 1989. V. 297. P. 287-296.
8. De Weck A.L. Cơ chế dược lý và hóa miễn dịch của quá mẫn với thuốc // Immunol Allergy Clin North Am. 1991. Số 11. P. 461-474.
9. Gilliland B.C. Rối loạn huyết học và tự miễn dịch do thuốc gây ra // Immunol Allergy Clin North Am. 1991. Số 11. P. 525-553.
10. Hiura M., Ozawa M., Othsuka T. a. o. Kích thích sản xuất anion superoxide ở bạch cầu đa nhân chuột lang bằng điều kiện giảm trương lực với các chất hoạt hóa protein kinase C // Arch. Hóa sinh. Lý sinh. 1991. C. 15. Số 291. P. 31-37.
11. Kishi K., Hirai K., Hiramatsu K., Yamasaki T., Nasu M. Clindamycin ngăn chặn nội độc tố do Escherichia coli O55: B5 được điều trị bằng ceftazidime tiết ra và sau đó sản sinh yếu tố hoại tử khối u alpha và interleukin-1 beta // Antimicrob Đặc vụ Che mẹ. 1999. V. 43. Số 3. P. 616-22.
12. Kovaks T., Stas I. và cộng sự. Cơ chế điều hòa thể tích của bạch cầu hạt người trong môi trường hipoosmotic // Acta Biochim. Lý sinh. Treo. 1989. Câu 24, số 1-2. P. 142-147.
13. De Weck A.L. Cơ chế dược lý và hóa miễn dịch của quá mẫn với thuốc // Immunol Allergy Clin North Am. 1991. Số 11. P. 461-474.
14. Labro M.T. Dược lý của spiramycin so với các macrolid khác // Drug Invest 1993. 6. Suppl 1. P. 15-28.
15. Lachani M., Usmani S. và cộng sự. In vitro tác dụng phát quang furosemideon của bạch cầu đa nhân trung tính ở trẻ sinh non // Biol.Neonate. 1997. V. 72. Số 3. P. 142147.
16. Muniz-Junqueira MI, Mota LM, Aires RB, Junqueira LF Jr. Digitalis ức chế và furosemide không làm thay đổi chức năng thực bào in vitro của bạch cầu trung tính của đối tượng khỏe mạnh // Int Immunopharmacol. 2003. V. 3. số 10-11. P. 1439-1445.
17. Munoz J., Geister R. Ức chế sự thực bào của aureomycin // Proc. Soc. NS. Biol. Med. 1950. V. 75. Số 2. P. 367-370.
18. Richardson M. D., Donaldson F. Tương tác của Candida crusei với bạch cầu trung tính ở người trong ống nghiệm // J. Med. Vi sinh. 1994. V. 41, Số 6. P. 380-388.
19. Vetvica V., Thornton B. P., Ross C. P. Polysaccharide beta-glucan hòa tan liên kết với vị trí lectin của bạch cầu trung tính hoặc thụ thể bổ thể tế bào tiêu diệt tự nhiên loại 3 (CD 11b / CD 18) tạo ra trạng thái chuẩn của thụ thể có khả năng làm trung gian gây độc của tế bào đích IC3b - opso hóa // J. Clin. Đầu tư. Năm 1996. Câu 98. P. 50-61.
Nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu- xét nghiệm máu, nhằm xác định khả năng dự trữ của bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân để thực hiện chức năng chính của chúng - hấp thụ và xử lý các tác nhân lạ. Thử nghiệm được thực hiện trong một chương trình miễn dịch phức tạp. Nó được chỉ định cho những bệnh nhân bị nhiễm trùng tái phát và mãn tính, các tình trạng suy giảm miễn dịch mắc phải và di truyền, các bệnh tự miễn dịch và ung thư đã trải qua các cuộc phẫu thuật phức tạp, bao gồm cả cấy ghép nội tạng. Máu toàn phần được phân tích. Nghiên cứu dựa trên đánh giá khả năng thực bào của vi khuẩn bằng nhãn huỳnh quang. Thông thường, bạch cầu hạt thực bào chiếm từ 82 đến 90% tổng số, bạch cầu đơn nhân thực bào - từ 75 đến 85%. Sự sẵn sàng của kết quả - lên đến 8 ngày.
Hoạt động thực bào của bạch cầu là một chỉ số trong phòng thí nghiệm phản ánh tỷ lệ phần trăm bạch cầu trung tính và bạch cầu đơn nhân có khả năng liên kết với hệ vi sinh gây bệnh và quá trình tiêu hóa của nó. Thực bào là những tế bào bảo vệ cơ thể khỏi bị nhiễm trùng. Chúng được coi là một thành phần của khả năng miễn dịch bẩm sinh, trong máu chúng được đại diện bởi hai loại bạch cầu - bạch cầu đơn nhân và bạch cầu trung tính. Bạch cầu đơn nhân là những tế bào lớn được gọi là đại thực bào. Chúng có khả năng hấp thụ, xử lý tế bào lớn và các hợp chất hữu cơ rõ rệt. Tại vị trí viêm, chúng thực bào vi khuẩn, khối bạch cầu và các tế bào bị ảnh hưởng. Kết quả là, các mô được làm sạch và chuẩn bị để tái sinh. Bạch cầu trung tính là vi đại bào, không giống như bạch cầu đơn nhân, chúng chỉ hấp thụ các tế bào nhỏ và các thành phần hữu cơ. Sau khi xử lý các tác nhân, bạch cầu trung tính chết, giải phóng các chất gây hại cho vi khuẩn và nấm, đồng thời tăng dòng tế bào miễn dịch đến vị trí viêm.
Xét nghiệm máu về hoạt động thực bào của bạch cầu giúp đánh giá khả năng dự trữ của bạch cầu đơn nhân và bạch cầu trung tính để tiêu hóa các tác nhân lạ. Những thay đổi về đặc điểm của tế bào thực bào không chỉ phản ánh phản ứng miễn dịch của cơ thể, mà còn phản ánh các tính năng của một số quá trình khác - chuyển hóa protein và carbohydrate, sự hiện diện của tình trạng nhiễm độc và suy kiệt của cơ thể, hoạt động phục hồi sau bệnh tật, v.v. , phân tích không chỉ được sử dụng trong miễn dịch học và các bệnh truyền nhiễm, mà còn được sử dụng trong bệnh thấp khớp, ung thư học, phẫu thuật. Kết quả nghiên cứu được hiển thị dưới dạng phần trăm số lượng thực bào hoạt động trên tổng số lượng của chúng. Việc phát hiện bạch cầu trung tính hoạt động và bạch cầu đơn nhân được thực hiện bằng cách sử dụng vi khuẩn có nhãn huỳnh quang. Vật liệu sinh học cho nghiên cứu là máu toàn phần với heparin.
Chỉ định
Nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu được chỉ định cho những trường hợp nghi ngờ suy giảm miễn dịch bẩm sinh hoặc mắc phải. Nó được kê đơn cho các bệnh truyền nhiễm kéo dài, mãn tính và tái phát - một dấu hiệu đặc trưng của việc giảm khả năng miễn dịch. Thông thường, bệnh nhân bị viêm phổi, viêm xoang, viêm tai giữa, viêm ruột, nhiễm nấm Candida, viêm bàng quang được gửi đi phân tích. Ngoài ra, các vết thương lâu ngày không lành và các biến chứng sau khi phẫu thuật có thể cho thấy cơ thể thiếu khả năng bảo vệ miễn dịch. Do đó, phân tích được thực hiện để chuẩn bị cho can thiệp phẫu thuật và với một diễn biến phức tạp của giai đoạn hậu phẫu, với thời gian phục hồi lâu dài sau chấn thương và bỏng. Các chỉ định khác cho nghiên cứu này bao gồm dị ứng, tự miễn dịch và ung thư. Kết quả cho phép chúng tôi đánh giá hoạt động của phòng vệ miễn dịch (thực bào) và vai trò của nó trong sự phát triển của bệnh.
Xét nghiệm máu về hoạt động thực bào của bạch cầu giúp xác định mức độ sẵn sàng thực sự của cơ thể để chống lại nhiễm trùng. Tuy nhiên, cần nhớ rằng chỉ tiêu này thay đổi dưới tác động của nhiều yếu tố. Vì vậy, hoạt động của bạch cầu đơn nhân và bạch cầu trung tính giảm sau khi gắng sức và tinh thần mệt mỏi, và tăng lên sau khi ăn thức ăn nhiều calo. Một hạn chế khác của phân tích là quy trình nghiên cứu kéo dài tới 8 ngày làm việc, kết quả thu được phản ánh tình trạng của một tuần trước.
Chuẩn bị phân tích và lấy mẫu vật liệu
Để nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu, máu được lấy từ tĩnh mạch. Một ngày trước khi phân tích, bạn cần loại trừ rượu khỏi chế độ ăn uống, hủy bỏ việc tập luyện thể thao và các hoạt động thể chất cường độ cao khác, và tránh các tình huống căng thẳng. Cũng cần hỏi ý kiến bác sĩ về ảnh hưởng của các loại thuốc đã dùng đến kết quả xét nghiệm; có thể một số loại thuốc sẽ tạm thời bị hủy bỏ. Lấy mẫu máu thường được thực hiện vào buổi sáng, sau khi nhịn ăn qua đêm, hoặc 4 giờ sau bữa ăn.
Máu được lấy từ tĩnh mạch cubital bằng cách chọc thủng; để nghiên cứu hoạt động thực bào của bạch cầu, phương pháp đánh giá khả năng thực bào của vi khuẩn bằng nhãn huỳnh quang thường được sử dụng nhất. Tế bào đơn nhân và bạch cầu trung tính, vật liệu thử nghiệm, được phân lập khỏi máu bằng cách ly tâm và rửa. Sau đó, nuôi cấy vi khuẩn phát quang được đưa vào mẫu, hỗn hợp được trộn lại và ủ, và số lượng bạch cầu đã thực bào vi khuẩn được xác định bởi cường độ phát quang. Kết quả phân tích được lập trong vòng 7-8 ngày làm việc. Hoạt động thực bào của bạch cầu đơn nhân và bạch cầu trung tính có thể được xác định bằng các phương pháp khác, ví dụ, bằng cách nhuộm các tế bào bị thực bào (phương pháp Romanovsky-Giemsa), bằng hoạt động của các enzym lysosome, sản xuất cytokine và sự hiện diện của các protein cation.
Giá trị bình thường
Kết quả xét nghiệm máu về hoạt động thực bào của bạch cầu được biểu thị bằng phần trăm số lượng tế bào thực bào từ tổng số của chúng. Các giá trị bình thường đối với bạch cầu hạt là từ 82 đến 90%, đối với bạch cầu đơn nhân - từ 75 đến 85%. Các tỷ lệ này là như nhau đối với bệnh nhân ở mọi lứa tuổi và cả hai giới tính. Sự giảm thực bào sinh lý có thể được xác định trong thời kỳ mang thai, sau khi hoạt động thể chất không tương ứng với mức độ luyện tập và sau khi căng thẳng về tình cảm.
Tăng và giảm chỉ số
Sự gia tăng hoạt động thực bào của bạch cầu không có giá trị chẩn đoán; nhiễm trùng cấp tính có thể là nguyên nhân. Hoạt động của bạch cầu đơn nhân và bạch cầu trung tính tăng lên so với mức ban đầu.
Phân tích hoạt động thực bào của bạch cầu đề cập đến các phương pháp nghiên cứu miễn dịch học. Các chỉ số của nó giúp xác định khả năng dự trữ của các tế bào máu để hấp thụ và tiêu hóa các tác nhân lây nhiễm, tức là mức độ sẵn sàng của cơ thể để chống lại sự phát triển của bệnh. Nếu kết quả xét nghiệm dưới mức bình thường, cần phải tham khảo ý kiến của bác sĩ chuyên khoa - bác sĩ miễn dịch, chuyên gia bệnh truyền nhiễm, bác sĩ phẫu thuật, bác sĩ thấp khớp, bác sĩ chuyên khoa ung thư. Việc giảm các chỉ số sinh lý có thể được điều chỉnh bằng cách lựa chọn đúng các hoạt động thể chất, phòng chống stress.
