Досвід лікування огрядності методом повного голодування Д.Д. Число хворих з надмірною вагою, згідно з даними багатьох

Ерітрон при тривалому аліментарному голодуванні та подальшому харчуванні людей Н. А. ФЕДОРОВ, Ю. Л. Шапіро (Москва) Голодування, як приватний розділ науки про харчування, за останні роки знову стало привертати до себе пильну увагу у зв'язку з дедалі ширшим його

Інтенсивність еритродієретичних процесів при голодуванні людей (математичний аналіз) Ю. Л. ШАПІРО, В. М. ЛУГОВСЬКОЇ (Москва) Як відомо, при повному аліментарному голодуванні протягом досить тривалого часу (принаймні до термінів, що характеризуються втратами)

Сироваткове та еритроцитарне залізо при тривалому голодуванні людей Ю. Л. ШАПІРО, Л. М. ДОНДИШ, Л. М. ЛЕЙБІН, Е. А. ЛЕЙЗЕРОВИЧ, Л. Ф. ЛЕВІНА (Москва) аліментарному голодуванні та подальшому харчуванні нечисленні та

Показник ступеня насиченості крові киснем при лікувальному голодуванні В. Б. ГУРВИЧ, Ю. Л. ШАПІРО, М. В. САМОЙЛОВА (Москва)

Динаміка показників периферичної крові при лікувальному голодуванні у хворих на гіпертонічну хворобу та ожиріння Г. Н. БЖИШКЯН-БОРОДИНА (Москва) Літературні дані щодо дослідження складу периферичної крові при лікувальному голодуванні представляють велику

Порівняльне вивчення дії повного тривалого голодування І білкової недостатності на склад периферичної крові мишей

pH сироватки крові хворих при лікувальному голодуванні В. А. СКОРИК-СКВОРЦОВА, В. А. КУЛАЧКОВ (Москва) Відомо, що так звані «жорсткі константи» зберігаються незмінними в організмі. факторів.

Про дію повного тривалого аліментарного голодування на хромосомний апарат лімфоцитів периферичної крові К. Н. ГРІНБЕРГ, Ю, Л. ШАПІРО, Є. А. КИРИЛОВА, Р. С. КУШНІР (Москва) Повне аліментарне голодування успішно застосовується при лікуванні деяких психічних

Зміна кількості та деяких параметрів статевого хроматину у людей у ​​процесі повного тривалого аліментарного голодування та подальшого харчування С. Н. РЕЗІНА, Ю. Л. ШАПІРО (Москва)

СТАН ІМУНОБІОЛОГІЧНОЇ РЕАКТИВНОСТІ ОРГАНІЗМУ ЛЮДИНИ ПРИ ПОВНОМУ ПРОТИВНОМУ ГОЛОДАНІЮ Ю. С. МИКОЛАЇВ, В. А. СКОРИК-СКВОРЦОВА (Москва) Вивчення стану імунобіологічної періоду

Матеріали до вивчення ферментної адаптації при повному лікувальному голодуванні А. А. ПОКРОВСЬКИЙ, Ю. С. МИКОЛАЇВ, Г. К. ПЯТНИЦЬКА, Г. І. БАБЕНКОВ (Москва) Протягом останніх років у нашій країні та за кордоном з'явилося велике число прихильників застосування голодування з лікувальною метою при

Зміна активності деяких Ферментів крові та печінки щурів при експериментальному голодуванні А. А. ПОКРОВСЬКИЙ, Г. К. П'ЯТНИЦЬКА (Москва) Проблема впливу голодування на різні показники обмінних процесів в організмі тварин та людини продовжує привертати увагу

Хімічний склад тканин щурів при повному голодуванні В. І. ДОБРИНІНА (Москва) Голодування як метод лікування успішно зарекомендував себе при деяких психічних та соматичних захворюваннях (3, 7, 10-13). Особливо перспективне його застосування при обмінних, алергічних

Деякі дані щодо білково-азотистого обміну в процесі лікувального голодування психічно хворих Л. І. ЛАНДО, Ю. С. МИКОЛАЇВ, Ю. Л. ШАПІРО, Г. Я. БАБЕНКОВ (Москва) на тваринах, так і у людей

Принцип способу.Деякі клітини білої крові (гранулоцити та меншою мірою моноцити) здатні in vitro і in vivo поглинати, а часто й руйнувати чужорідні частинки за допомогою своїх ферментів. Причому сам процес проходить кілька стадій, які включають хемотаксис, фагоцитоз, руйнування мікробів та перетравлення поглинених речовин. При повторному контакті чи специфічної імунізації клітини опсонуються, т. е. ця здатність посилюється. Розроблено велику кількість методик визначення фагоцитарної активності клітин крові. Для цього використовують певну тест-систему (конкретний вид мікробів, зимозан). В одних випадках реакцію проводять у пробірках або чашках Петрі на агарі, а в інших – усередині організму тварини (внутрішньосудинно, інтраперитенально або методом «віконця рога»).
Хід визначення.
1. Приготування тест-системи: мікробна завись із вмістом 1-2 млрд тіл в 1 мл за оптичним стандартом.
2. Змішування 2%-ного розчину лимоннокислого натрію, крові та мікробної суспензії у співвідношенні 1:2:1 та термостатування 30 хв при температурі 40,5 °С.
3. Центрифугування при 1500 об/мні 10 хв і приготування мазків на предметному склі з верхнього шару осаду і на агарі в чашках Петрі.
4. Фіксація препаратів метиловим спиртом протягом 3-5 хв та забарвлення за Романовським – Гімза протягом 10-15 хв.
5. Облік реакції. У забарвлених мазках під мікроскопом (збільшіть 90x7) підраховують 100 нейтрофілів або моноцитів, що містять або ні мікробів, враховуючи кількість мікробів у клітині та ступінь їх фарбування (перетравлення). Вираховують відсоток фагоцитованих клітин - показник активності, і середня кількість мікробів на один фагоцит - фагоцитарний індекс; відношення числа переварених мікробів до загального числа фагоцитованих клітин дає відсоток перетравлення, а середнє їхнє число на один фагоцит дає індекс перетравлення.
Для кількісної оцінки здатності фагоцитів, що перетравлює, введено поняття індексу завершеності фагоцитозу. Для цього визначають відношення відсотка фагоцитозу, отриманого через 30 хв інкубації, до відсотка фагоцитозу через 2 години та відношення фагоцитарних індексів. Прийнято вважати, що й індекс завершеності фагоцитозу більше 1, то фагоцитоз завершений, якщо менше - незавершений. Для оцінки ступеня підвищення фагоцитозної активності лейкоцитів при специфічній імунізації вираховують опсонофагоцитарний індекс по відношенню до фагоцитарних чисел у імунізованих та контрольних тварин. У новонароджених тварин доцільно обчислити елімінуючу здатність лейкоцитів крові за абсолютним числом фагоцитованих мікробів усіма фагоцитами, що містяться в 1 мкл крові, тобто отримати абсолютні показники.

Дослідження фагоцитарної активності лейкоцитів – аналіз крові, який спрямований на визначення резервних можливостей нейтрофілів та моноцитів до виконання їх основної функції – поглинання та переробки чужорідних агентів. Тест виконується у комплексі імунограми. Він показаний пацієнтам з рецидивуючими та хронічними інфекціями, набутими та генетичними імунодефіцитними станами, аутоімунними та онкологічними захворюваннями, що перенесли складні операції, у тому числі з трансплантації органів. Аналізу піддається цілісна кров. Дослідження ґрунтується на оцінці фагоцитозу бактерій з флуоресцентними мітками. У нормі фагоцитуючі гранулоцити становлять від 82% до 90% від загальної кількості, фагоцитуючі моноцити – від 75% до 85%. Готовність результатів – до 8 днів.

Фагоцитарна активність лейкоцитів – лабораторний показник, який відображає відсоток нейтрофілів та моноцитів, здатних до зв'язування з патогенною мікрофлорою та її перетравлення. Фагоцити – клітини, що захищають організм від розвитку інфекцій. Вони вважаються компонентом вродженого імунітету, у крові представлені двома видами лейкоцитів – моноцитами та нейтрофілами. Моноцити є великими клітинами макрофагами. Вони мають виражену здатність до поглинання, переробляють великі за розмірами клітини і органічні сполуки. У місці запалення вони фагоцитують бактерії, лейкоцитарну масу, уражені клітини. В результаті тканини очищаються та готуються до регенерації. Нейтрофіли відносяться до мікрофагів, на відміну від моноцитів поглинають лише невеликі клітини та органічні компоненти. Після переробки агентів нейтрофіли гинуть, вивільняють речовини, які ушкоджують бактерії та грибки, посилюють приплив імунних клітин до осередку запалення.

Аналіз крові на фагоцитарну активність лейкоцитів дозволяє оцінити резерв моноцитів та нейтрофілів до перетравлення чужорідних агентів. Зміна характеристик фагоцитів відображає не тільки імунологічну реактивність організму, але й особливості деяких інших процесів – білкового та вуглеводного обміну, наявність інтоксикації та виснаження організму, активність відновлення після захворювань тощо. та у ревматології, онкології, хірургії. Результати дослідження відображаються як відсоток активних фагоцитів до їхньої загальної кількості. Виявлення активних нейтрофілів та моноцитів проводиться за допомогою бактерій з флуоресцентними мітками. Біоматеріалом для дослідження є цільна кров із гепарином.

Показання

Дослідження фагоцитарної активності лейкоцитів показано за підозри на вроджений чи набутий імунодефіцит. Воно призначається при затяжних, хронічних та рецидивуючих інфекційних захворюваннях – характерною ознакою зниження імунітету. Найчастіше на аналіз спрямовуються пацієнти з пневмонією, синуситом, отитом, ентероколітом, кандидозом, циститом. Також про недостатність імунного захисту можуть свідчити рани, що тривало не гояться, ускладнення після операцій. Тому аналіз виконується при підготовці до хірургічного втручання та при ускладненому перебігу післяопераційного періоду, при тривалому відновленні після травм та опіків. До інших показань для цього дослідження відносяться алергічні, аутоімунні та онкологічні захворювання. Результати дозволяють оцінити активність імунного захисту (фагоцитозу) та її роль у розвитку хвороби.

Аналіз крові на фагоцитарну активність лейкоцитів дозволяє визначити фактичну готовність організму до протистояння інфекціям. Однак варто пам'ятати, що цей показник змінюється під впливом багатьох факторів. Так, активність моноцитів та нейтрофілів знижується після фізичного навантаження та при розумовій втомі, а після прийому калорійної їжі підвищується. Ще одним обмеженням аналізу і те, що процедура дослідження займає до 8 робочих днів, отримані результати відбивають стан тижневої давності.

Підготовка до аналізу та забір матеріалу

Для дослідження фагоцитарної активності лейкоцитів проводиться забір крові із вени. За день до аналізу слід виключити з раціону алкоголь, скасувати спортивні тренування та інші інтенсивні фізичні навантаження, уникати стресових ситуацій. Також необхідно проконсультуватися з лікарем про вплив ліків на результат дослідження, можливо, деякі препарати будуть тимчасово відмінені. Процедура забору крові, як правило, проводиться з ранку, після нічного періоду голодування або через 4 години після їди.

Кров береться з ліктьової вени з допомогою пункції, на дослідження фагоцитарної активності лейкоцитів найчастіше використовується метод оцінки фагоцитозу бактерій з флуоресцентною міткою. З крові шляхом центрифугування та відмивання виділяють моноцити та нейтрофіли – досліджуваний матеріал. Потім зразок вводять культуру люмінесцентних бактерій, суміш ресуспендують і інкубують, за інтенсивністю люмінесценції визначають кількість лейкоцитів, що фагоцитували бактерії. Результати аналізу готуються протягом 7-8 робочих днів. Фагоцитарна активність моноцитів і нейтрофілів може бути визначена й іншими методами, наприклад, фарбуванням клітин, що фагоцитували (метод Романовського-Гімзи), за активністю лізосомальних ферментів, виробництва цитокінів, присутності катіонних білків.

Нормальні значення

Результат аналізу крові на фагоцитарну активність лейкоцитів виявляється у відсотках фагоцитуючих клітин від їх загальної кількості. Значення норми гранулоцитів – від 82 до 90%, для моноцитів – від 75 до 85%. Ці показники однакові для пацієнтів різного віку та обох статей. Фізіологічне зниження фагоцитозу може визначатися під час вагітності, після фізичного навантаження, що не відповідає рівню підготовки, та після емоційного стресу.

Підвищення та зниження показника

Підвищення фагоцитарної активності лейкоцитів немає діагностичної значущості, причиною можуть стати гострі інфекції. Активність моноцитів та нейтрофілів збільшується щодо вихідного рівня.

Аналіз фагоцитарної активності лейкоцитів належить до імунологічних методів дослідження. Його показники дозволяють визначити резервні здібності клітин крові до поглинання та перетравлення інфекційних агентів, тобто готовність організму протистояти розвитку захворювання. Якщо результати аналізу нижче норми, необхідно проконсультуватися з лікарем – імунологом, інфекціоністом, хірургом, ревматологом, онкологом. Фізіологічне зниження показників можна скоригувати правильним підбором фізичного навантаження, профілактикою стресу.

www.krasotaimedicina.ru

Лікар імунолог-алерголог Болібок Володимир Анатолійович

Антитіла чи імуноглобуліни. Імуноглобуліни є досить великими і складними молекулами білків, які синтезуються клітинами імунної системи – плазматичними клітинами. У свою чергу, плазматичні клітини походять із B-лімфоцитів. Імуноглобуліни мають властивість зв'язуватися з чужорідними молекулами (білками, ліпопротеїдами), що знаходяться як у розчиненому стані, так і на поверхні вірусів, бактерій тощо. Чужорідні молекули можуть бути і на мембрані власних клітин, якщо ці клітини інфіковані вірусами чи мутировали. Антитіла самі по собі не можуть вбити вірус, бактерію чи клітину, або хімічно зруйнувати токсин, що виділяється бактеріями. Але можуть, по-перше, їх нейтралізувати, порушити функцію чи зняти токсичність; по-друге, «вказують» імунній системі на «чужинця», якого слід знищити. Після того, як антитіла прореагували з чужорідними молекулами на поверхні вірусів, бактерій та ін об'єктів, у бій з ними вступають білки системи комплементу, цитотоксичні Т-лімфоцити або клітини-фагоцити (нейтрофіли та моноцити-макрофаги). При цьому зв'язування антитіл дуже вибіркове - один вид антитіл реагує тільки з чужорідною молекулою, проти якої він виробляється. Ця властивість називається специфічністю антитіл. Наприклад, антитіла проти вірусу кору не реагують із вірусом вітряної віспи, і навпаки.

За хімічною будовою імуноглобуліни поділяються на 5 класів:

Імуноглобуліни класу G. Це основний клас захисних антитіл, що становить понад 80% всіх антитіл, що циркулюють у крові та у внутрішньому середовищі організму. Імуноглобуліни класу G починають вироблятися приблизно через 7 – 10 днів після першого контакту з незнайомою інфекцією та їх рівень наростає до максимуму приблизно на 30 – 40 день. Імуноглобуліни класу G довго зберігаються в крові, іноді їх синтез триває роками та десятиліттями, і саме вони забезпечують набутий імунітет до більшості інфекцій, як після захворювання, так і після вакцинації. Імуноглобуліни класу G можуть проникати через плаценту до дитини, що розвивається, і накопичуватися в крові дитини перед народженням. У цьому вся є глибокий сенс, т.к. дитина з материнськими антитілами набуває і імунітету проти тих інфекцій, з якими контактує мати у своєму звичайному оточенні.

Імуноглобуліни класу M. Це найбільші антитіла і вони виробляються в першу чергу при контакті з незнайомою інфекцією. Імуноглобуліни класу M з'являються протягом першої доби від початку інфекції, помітний рівень створюється вже до 3 – 4 дня, максимум – на 7 – 10 день, а потім, після знищення інфекції в організмі, вони швидко зникають – приблизно через 4 – 6 тижнів. Імуноглобуліни класу M не проникають через плаценту.

Імуноглобуліни класу A. Ці так звані секреторні антитіла. Вони виділяються зі слизом через слизові оболонки в дихальні шляхи, по ходу шлунково-кишкового тракту, зі слізною рідиною на кон'юктиви, потім і салом на шкіру. Основне призначення імуноглобулінів класу A – знищувати та блокувати інфекцію до того, як вона зможе проконтактувати з покривними тканинами організму та перешкоджати впровадженню інфекції всередину організму. Імуноглобуліни класу A не проходять через плаценту. Імуноглобуліни класу A у значних кількостях виділяються через молочні залози з грудним молоком (особливо висока концентрація IgA у молозиві), та оберігають слизові оболонки новонародженої та грудної дитини від інфекції.

Імуноглобуліни класу D. Концентрація цих антитіл у крові також дуже низька – менше 1%. Імуноглобуліни класу D, на відміну від інших класів імуноглобулінів, синтезуються не плазматичними клітинами, а самими лімфоцитами, і є злущені рецептори з поверхні зовнішньої мембрани лімфоцитів, по суті – це уламки мембрани загиблих лімфоцитів. Клінічне значення цих імуноглобулінів досі не з'ясовано, тому їх рівень зазвичай не перевіряють.

Білки системи комплементу.

Антитіла або імуноглобуліни, як сказано вище, здатні зв'язуватися з вірусами та бактеріями, але не здатні їх вбивати. Здатність вбивати бактерії, грибки та інші клітини має білки системи комплементу. У системі комплементу налічують 9 основних та 2 додаткових білки, всі вони знаходяться в крові та готові негайно слідом за антитілами атакувати «чужинців». Ці білки відносяться до білків-ферментів, а саме до протеазів. Білки системи комплементу здатні, взаємодіючи між собою, збиратися в своєрідну «трубочку» або «голку», яка протикає оболонку вірусу, мікроба або власної інфікованої або чужорідної клітини, що стала, саме в тому місці, де прореагували антитіла. Ця «голка» зветься «мембранно-атакуючий комплекс». В результаті в оболонці клітини утворюється дірка. З огляду на те, що з мікробом може одночасно прореагувати понад 10000 молекул антитіл, у ньому одночасно утворюється така сама кількість «дірок» від білків. Під електронним мікроскопом поверхня клітини, яку атакують антитіла з комплементом, виглядає як місячний краєвид, виритий кратерами від метеоритів. Оскільки концентрація солей усередині мікробної клітини вище, ніж зовні, вода через пори в мембрані спрямовується всередину мікробної клітини і мікроб у буквальному значенні лопається, роздутий водою. Відбувається лізис мікроба, яке останки поїдають фагоцити.

Комплемент – це зброя швидкого реагування. Білки системи комплементу вступають у реакцію негайно, як тільки антитіла виявлять чужинця. Це важливо для захисту від інфекції в ранах - якщо активність комплементу в організмі висока, то інфекція, що потрапила в рану, буде знищена практично моментально, і рана (захищена від подальшого інфікування струпом з крові, що згорнулася) не нагноиться.

Лізоцим.

В організмі виробляються спеціальні ферменти, здатні розчиняти оболонку бактерій, їх найбільш вивчений – лизоцим (мурамилпептидаза). При розчиненні оболонки лізоцим мікроб втрачає свої патогенні властивості, не може далі інфікувати організм і стає легшою мішенню для антитіл і комплементу і легшою «їжею» для фагоцитів.

Інтерферони.

Це особлива група білків, яку виробляють як клітинами імунної системи (лейкоцитами), так і іншими клітинами організму, найчастіше епітеліальними, якщо вони інфіковані яким-небудь вірусом. Інтерферони захищають будь-які інші клітини організму від інфікування вірусом. Інакше будь-яка вірусна інфекція призводила до того, що інфікованими ставали всі клітини організму.

C-реактивний білок.

Цей білок присутній у крові в дуже незначній кількості, але його кількість збільшується в десятки та сотні разів при появі вогнища бактеріального запалення. Тому С-реактивний білок (читається Ц) відноситься до білків "гострої фази". СРБ здатний пов'язувати і «склеювати» між собою оболонки бактерій: у процесі розмноження мікроби залишаються склеєними між собою та утворюють великий конгломерат із мікробних клітин. По-перше, це не дає мікробам розноситися зі струмом крові та лімфи по організму. По-друге, усередині такої «колонії» мікроби не отримують достатньої кількості поживних речовин та їх зростання та розмноження сповільнюється або зупиняється зовсім. По-третє, на налиплий на оболонці мікробів С-реактивний білок фагоцити реагують підвищеною активністю і починають поглинати ці мікроби з більшою жадібністю.

doctor-bolibok.narod.ru

Фагоцитарна активність нейтрофілів

Фагоцитарну функцію клітин периферичної крові прийнято оцінювати за відсотком фагоцитуючих нейтроцитів на кількість Іншими словами, абсолютний фагоцитарний показник – це число мікробів, які здатні поглинути нейтрофіли, що містяться у 1 мм3 крові. При постановці реакцій фагоцитозу використовують завись убитих мікроорганізмів та кров хворого. Після інкубації крові та бактерій у термостаті готують мазки, забарвлюють їх та оцінюють поглинальну здатність гранулоцитів.

Для постановки реакції фагоцитозу використовують також завись живих мікроорганізмів. У цих випадках фагоцитарна активність гранулоцитів буде в 2 - 2; 5 рази нижче, ніж у реакціях з убитими бактеріями. Розеткоутворюючі властивості нейтрофілів. В останні роки з'ясовано, що нейтрофіли людини мають на поверхні своєї мембрани рецептори до ряду компонентів комплементу та Fc-фрагментів імуноглобулінів. Встановлено також наявність на мембрані нейтрофілів рецепторів до еритроцитів барана.

Як і лімфоцити, нейтрофіли можуть бути розділені на популяції за їх здатністю до спонтанного розеткоутворення з еритроцитами барана та до комплементарного розеткоутворення з алогенними еритроцитами у присутності комплементу та імуноглобулінів.

Постановка реакцій спонтанного та комплементарного розеткоутворення нейтрофілів аналогічна до постановки реакцій спонтанного та комплементарного розеткоутворення лімфоцитів. Комплементарна активність сироватки. Компоненти комплементу біологічно інертні, але при активації комплексом антиген - антитіло набувають властивостей ензимів та відіграють виражену (захисну або деструктивну) роль в імунному цитолізі. Крім цитолізу, комплемент безпосередньо бере участь у різних проявах неспецифічного захисту організму і головним чином різних фазах запальної реакції, як клітинної, і гуморальної.

Серед цих проявів найбільш вивчена активність комплементу, що призводить до вивільнення гістаміну і підвищення проникності капілярів, керує хемотаксисом і підвищує здатність нейтрофільних гранулоцитів, що сприяє фагоцитуванню, сприяє імунному прилипання і опсонізації фагоцитуючих частинок і порушення клітинної стінок.

Підвищуючи проникність дрібних кровоносних судин, комплемент, очевидно, бере участь у управлінні міграцією гранулоцитів.

Система комплементу представлена ​​білковими молекулами, які локалізуються в альфа- та бета-глобулінових фракціях і складається з 11 білків сироватки крові, що становлять 9 компонентів.

Для активації системи комплементу необхідні спеціальні субстанції, внаслідок впливу яких компоненти комплементу активують один одного у суворій послідовності (каскадне або секвенційне включення) двома шляхами – класичним та альтернативним (або пропердиновим).

Активація класичного шляху викликається комплексом антиген - антитіло, агрегованим імуноглобулінами класів G і М, або комплексами поліаніон - полікатіон, таким, наприклад, як гепарин-протаміновий комплекс. При цьому перший компонент комплементу (С1) утворює С1-естеразу, яка розщеплює четвертий (С4) та другий (С2) компоненти комплементу, сприяючи утворенню СЗ-конвертази класичного шляху.

Альтернативний шлях активації комплементу є еволюційно давнішим. Він найбільш важливий в антибактеріальному захисному механізмі, перш ніж почнуть вироблятися специфічні антитіла. Активація по альтернативному шляху викликається агрегованими імуноглобулінами класів А та Е, розчинними та нерозчинними полісахаридами оболонок бактерій і не вимагає наявності С1-, С4- та С2-компонентів комплементу.

У першій стадії на поверхні активатора утворюється ензим як наслідок взаємодії факторів компонента СЗ. Ензим дуже лабільний, але здатний розщеплювати СЗ і таким чином сприяти утворенню більш ефективної СЗ-конвертази. Утворення СЗ-конвертази і розщеплення під впливом третього компонента комплементу є вузловими моментами обох шляхів активації.

На цій стадії відбуваються комплементзалежні клітинні взаємодії. Так звані комплементарні мости беруть участь в індукції імунних відповідей, елімінації імунних комплексів та контролі бактеріальних інфекцій. Утворення таких мостів тривалий час було відоме як імунне прилипання.

Цей феномен використовується у тесті комплементарного розеткоутворення. Обидва шляхи активації комплементу ведуть до генерації біологічно активних фрагментів компонентів комплементу. Так, система комплементу активується агентами, які постійно присутні в нормально функціонующем організмі.

У процесі еволюції розвинулися механізми контролю її активації. Існують два основних механізми регулювання активації комплементу. Перший властивий самій системі і полягає у лабільності СЗ-конвертази обох шляхів, що лімітує активацію наступних компонентів комплементу, що беруть участь у каскадному включенні активації (С5 - С9).

Другий здійснюється спеціальними природними білками-інгібіторами. З них найбільш важливі С1-інгібітор, який утворює комплекс із фрагментом С2, не даючи йому далі розщеплювати С4 та С2, і таким чином контролює складання СЗ-конвертази класичного шляху, та СЗ-інактиватор, який служить основним контрольним білком системи комплементу, розщеплюючи СЗ у рідкій фазі на два гемолітично неактивні білки.

Є дані про зміни у системі комплементу за різних патологічних станах. Так, Kassel (1977) у більш ніж 5000 хворих на рак різної локалізації встановив дефіцит комплементу та його компонентів.

Окремі компоненти сироваткового комплементу зазвичай визначають методом радіальної імунодифузії по Манчіні з використанням моноспецифічних антисироваток до того чи іншого компонента. Активність комплементу оцінюють також за його здатністю лізувати еритроцити у присутності антитіл проти них.

За одиницю гемолітичної активності комплементу приймають активність, необхідну для лізису 50% еритроцитів у присутності антитіл. Використовуючи метод кінетичного титрування, реакцію можна записати у часі. Ця реакція якісна і не дає уявлення про концентрації комплементу та його компонентів.

«Корекція імунітету у хворих на рак

передміхурової залози», В.А.Савінов

www.medchitalka.ru

Фагоцитарна активність лейкоцитів периферичної крові у різних видів тварин

ОСОБЛИВОСТІ ФОРМУВАННЯ РОЗЦЕНОК НА ВЕТЕРИНАРНІ ПОСЛУГИ ПРИ ОБСЛУГОВУВАННІ ДРІБНИХ ДОМАШНІХ ТВАРИН

Трофімова Є.М.

Врахування особливостей формування розцінок на ветеринарні послуги при обслуговуванні дрібних домашніх тварин забезпечує встановлення науково - обґрунтованих розцінок, що використовуються у ветеринарній практиці.

FEATURES OF FORMATION OF QUOTATIONS ON VETERINARY SERVICES AT

SERVICE OF SMALL PETS

Облік особливостей формування quotations on veterinary services at service of male pets provides establishment scientifically - well-founded quotations which are used in veterinary practice.

УДК 619:616 - 002.5

ФАГОЦИТАРНА АКТИВНІСТЬ ЛЕЙКОЦИТІВ ПЕРИФЕРИЧНОЇ КРОВІ У РІЗНИХ ВИДІВ ТВАРИН

Трубкін А.І., Харітонов М.В.

ФГОУ ВПО «Казанська державна академія ветеринарної медицини імені М.Е. Баумана»

Ключові слова: мікобактерія, штам, фагоцитарна активність.

Key words: mycobacterium, strain, phagocytic activity.

Кров є одним з найбільш тонких і чутливих показників, що вказують на функціональний стан організму, що відображають картину боротьби його з мікроорганізмами, що впровадилися, гельмінтами та його реактивну здатність. Розроблена І.І. Мечниковим теорія захисної ролі фагоцитів у боротьбі організму з патогенними мікробами, що впровадився в його тканині, стала першим кроком до побудови теорії протиінфекційного імунітету. За даними літературних джерел, фагоцитоз при туберкульозній інфекції має неспецифічний захисний характер. Однак є ряд спостережень, які свідчать про те, що певний ступінь специфічності у фагоцитарних реакціях при туберкульозі є. Наприклад,

А.Д. Тимофіївський, С.В. Білеволенська (1927), Г.Д. Бєлановський (1928) показали, що фагоцитуючі клітини перитоніального ексудату, периферичної крові, селезінки та легені, імунізованих та природно резистентних тварин не руйнуються в присутності вірулентних мікобактерій, а навпаки, пригнічують їх розмноження.

Ще складнішим є питання долі самих туберкульозних мікобактерій, що проникають у організм, і тієї реакції, що вони викликають у органах. За літературними джерелами (А.С. Рабухін, 1941; Ю.А. Лебедєва, С.М. Сажина, 1913 та ін.) у присутності вірулентної туберкульозної культури спочатку відбувається нейтрофільний лейкоцитоз і фагоцитоз туберкульозних мікобактерій нейтрофільними лейкоцитами, наповнених збудником. При цьому лейкоцити від хворих на неспецифічні захворювання легень, з обмеженою формою туберкульозу, у випадках інфікування малими дозами туберкульозних паличок відбувається посилений перехід їх у лімфобласти. У той же час лейкоцити, що страждають на хронічні або гострим перебігом туберкульозу, піддаються швидкому розпаду.

У зв'язку з цим певний інтерес викликало порівняльне вивчення фагоцитарної активності лейкоцитів периферичної крові у різних видів тварин, у тому числі у морських свинок та кроликів.

Матеріали та методи. Використовували лейкоцити периферичної крові здорових тварин: велику рогату худобу, коні, вівці, кози, собаки, кролика, морської свинки, білого щура.

Щоб кров не згорнулася, її гепаринізували з розрахунку 4 од. ін'єкційного гепарину на 1 мл крові. Після попереднього перемішування пробірки з кров'ю протягом 1 години залишали під кутом 100 при кімнатній температурі. Потім пробірки ставили під кутом 450 протягом 15-20 хв. при цьому необхідна кількість лейкоцитів для постановки дослідів накопичується між еритроцитами та плазмою у вигляді туману. Лейкоцити, що накопичилися, відсмоктували і вносили у флакони з вмістом по 5 мл середовища 199. Після легкого перемішування отриманої суміші, у флакони вносили M. bovis штаму N14 культури мікобактерій по стандартній каламутності 1 мг в 1 мл фізіологічного розчину.

Флакони закривали гумовою пробкою і після легкого перемішування у вертикальному положенні помістили термостат при температурі 370С.

Спочатку через кожні 15 хв. (15,30,45,60,75,90,105,120хв), а потім через3,4,5,6,24,48 і 72 год. з моменту інкубації робили мазки за допомогою спеціально виготовленого для цієї мети скла під кутом 200. фіксували у насиченому розчині дволористої ртуті 2-3 хв. і фарбували карболовим фуксином Циля, знебарвлювали 2,5% - ним розчином сірчаної кислоти. Для розчинення еритроцитів додатково

обробляли розчином оцтової кислоти і додаткового фарбування 0,5% - ним розчином метиленової синьки, змішаної з 0,5% - ним розчином соди.

Підраховували 100 поліморфних ядерних лейкоцитів, по 50 одиниць з кожного краю мазка, і виводили фагоцитарну активність лейкоцитів у відсотках.

Фагоцитарний показник визначили наступним чином, підраховували кількість фагоцитованих туберкульозних паличок у 100 лейкоцитах та отриману кількість ділили на кількість переглянутих лейкоцитів.

Результати досліджень. Вивчення фагоцитарної активності лейкоцитів периферичної крові у різних видів тварин по відношенню до вірулентних культур мікобактерій туберкульозу бичачого виду показало, що у перші 15 хв. після контакту лейкоцитів відбувається накопичення мікробних тіл навколо фагоцитованих клітин крові (атракція), але при цьому ще не спостерігали поглинання мікробних тіл. Через 30 хв., після введення мікобактерій виявлялося підвищення фагоцитарної активності лейкоцитів по відношенню до мікобактерій у всіх видів тварин. Як видно з таблиці 1, у перші 30 хв. значну фагоцитарну активність виявляють лейкоцити білого щура (9,2±2,03%; Р

У продуктивних тварин висока фагоцитарна активність лейкоцитів спостерігалася у кози 62 ± 210% (Р

Поруч із фагоцитарной активністю лейкоцитів було вивчено фагоцитарний показник, - кількість фагоцированных мікробів у 100 лейкоцитах. Дані, що показують середнє число поглинених мікобактерій однією фагоцит представлені у таблиці 2. причому, для врахування інтенсивності фагоцитозу всі лейкоцити, що фагоцитували, розбивали на три групи: в першу входили клітини, що містять від 1 до 10 мікобактерій; у разі такі клітини становили 80%; у другу -від10 до 20, такі клітини, становили 15%; у третю - понад 20 мікобактерій, такі клітини становили 5%, із усіх підрахованих клітин.

Як видно з таблиці, первісний фагоцитарний показник щодо вірулентної культури мікобактерій бичачого виду у всіх тварин був нижчим за одиницю.

* 15 30 45 60 75 90 105 120 3 ч. 4 ч. 5 ч. 6 ч. 24 ч. 48 ч. 72 год.

1. Кінь 3 6,8 ± 1,62 3,5 ± 0,95 4,3 ± 1,10 5,8 ± 1,31 6,4 ± 1,68 8,7 ± 1,62 10,0 ± 2,71 18,5 ± 4,00 25,0 ± 3,10 28,6 ± 3,80 30,0 ± 3,22 39,0 ± 3,50 43,9 ± 7,72 48,4 ± 6 ,20 48,7±5,20

2. Кр. ріг. худоба 3 5,0 ± 1,03 3,4 ± 0,93 4,8 ± 1,19 5,8 ± 1,14 5,8 ± 1,39 7,4 ± 2,31 12,2 ± 2, 96 19,0 ± 3,43 26,1 ± 3,31 27,6 ± 5,19 38,8 ± 6,05 40,0 ± 6,15 41,6 ± 8,07 43,0 ± 8,11 43,2±5,08

3. Вівця 3 5,6 ± 1,11 0,05 4,8 ± 1,05 0,05 6,2 ± 1,21 9,2 ± 2,05 12,4 ± 3,63 15,8 ± 2 ,33 19,8 ± 2,91 24,2 ± 3,81 30,0 ± 4,01 33,8 ± 4,17 38,8 ± 5,26 40,0 ± 4,15 44,8 ± 5, 17 49,6±5,09 51,8±7,11

4. Коза 3 6,4 ± 2,09 6,2 ± 2,10 7,8 ± 2,20 9,2 ± 2,81 11,0 ± 2,33 19,4 ± 3,17 23,0 ± 3,19 25,4 ± 4,21 35,8 ± 6,15 37,0 ± 5,11 40,0 ± 5,08 44,4 ± 5,19 52,0 ± 7,01 55,6 ± 7 ,12 60,4±7,07

5. Собака 3 6,6 ± 1,15 7,8 ± 2,03 9,2 ± 2,97 12,0 ± 3,53 12,8 ± 3,31 19,8 ± 3,03 26,1 ± 3,95 31,0 ± 3,91 38,4 ± 5,05 38,2 ± 4,17 40,4 ± 6,09 43,2 ± 6,12 49,5 ± 7,05 55,8 ± 8 ,11 67,0 ± 8,19

6. Кролик 3 4,3±1,90 2,8±0,9 3.1±1.01 3,8±1,56 3,9±1,65 5,0±1,68 5,4±1,35 7 ,4±2,06 7,8±2,11 9,0±2,19 12,6±2,51 17,8±3,19 0,05 24,4±4,11 0,05 27,0 ± 4,92 31,0 ± 5,15 0,05

7. М. свинка 3 2,6 ± 1,07 1,2 ± 0,32 1,5 ± 0,95 2,0 ± 1,04 2,2 ± 1,00 2,8 ± 1,04 3, 4±1,17 3,8±1,23 4,1±1,92 5.0±2.00 5,6±1,92 6.3±2.03 11,8±3,09 13,2±3,19 17,2± 4,05

8. Білий щур 3 8,1 ± 1,35 9.2 ± 2.03 13,0 ± 2,20 19,6 ± 3,35 27,6 ± 5,49 31,6 ± 5,82 37,4 ± 6,05 43,8 ± 6,11 56,6 ± 7,14 59,8 ± 8,07 65,0 ± 8,15 72,3 ± 8,03 84,4 ± 8,15 87,0 ± 9,07 87 ,6±9,19

* - атракція мікобактерій на поверхні лейкоцитів

№ п/п Вид тварин після контакту з збудником через:

15 30 45 60 75 90 105 120 3 ч. 4 ч. 4 ч 5 ч. 6 ч. 24 ч. 48 ч. 72 год.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18

1. Кінь 3 – 0,9±0,03 1,78±0,86 2,82±1,25 3,13±1,08 3,3±1,01 3.9±1.10 4,07±1,51 5,32±1,58 5,4±1,96 5,95±1,05 5,96±1,14 6,8±1,6 8,1±2,90 8,2±1,70

2. Кр. ріг. худоба 3 - 0,9±0,02 1,5±0,51 2,0±0,52 2,2±0,91 2,8±0,85 3,1±1,05 3,6±1 ,21 4,0±1,65 4,8±1,12 5,2±2,01 5,6±2,12 5,4±1,36 5,6±2,05 5,6±2, 17

3. Вівця 3 – 0,8±0,02 1,8±0,30 2,3±0,15 2,8±0,65 3,3±1,02 4,4±1,65 5,8 ± 2,01 5,8 ± 2,11 6,4 ± 3,03 6,0 ± 3,05 6,2 ± 3,18 6,0 ± 2,31 6,8 ± 2,15 6,8 ± 3,11

4. Коза 3 - 0,8±0,11 1,7±0,20 2,1±0,80 2,3±0,7 3,8±1,05 4,0±2,11 4,4 ± 2,01 5,1 ± 2,03 6,4 ± 2,11 6,8 ± 2,19 6,8 ± 2,35 7,6 ± 3,05 7,8 ± 3,12 7,8 ± 3,11

5. Собака 3 0,2 ± 0,01 0,8 ± 0,05 1,7 ± 0,15 2,3 ± 0,17 3,01 ± 1,01 4,5 ± 1,17 5,9 ± 1,19 6.5±2.05 7,2±2,01 7,5±2,10 7,8±2,05 8,7±3,15 9.5±3.05 9,9±3,41 10,1±3, 11

6. Кролик 3 0,3±0,02 1,9±0,3 1,9±0,61 1,3±0,85 2,0±0,90 2,1±0,80 2,6± 0,31 2,9 ± 0,68 2,9 ± 0,35 3,0 ± 1,05 3.0 ± 1.01 3,8 ± 1,15 3,9 ± 1,12 3,9 ± 1,05

7. М. свинка 3 - 0,1 ± 0,01 1,2 ± 0,3 1,6 ± 0,03 1,9 ± 0,2 1,1 ± 0,30 1,3 ± 0,9 1 ,3 ± 0,12 1,8 ± 0,75 1,9 ± 0,90 1,9 ± 0,85 2,0 ± 0,64 2,6 ± 1,01 2,6 ± 1,00 2, 7±0,45

8. Білий щур 3 0,3 ± 0,1 0,9 ± 0,05 1,0 ± 0,04 2,8 ± 0,31 3,6 ± 1,15 5,3 ± 1,36 6,8 ± 2,02 7,5 ± 2,33 8,8 ± 2,14 9.0 ± 3.00 9,2 ± 3,06 9,1 ± 2,95 9,9 ± 2,12 10,0 ± 3,01 10 ,3±3,05

У міру терміну культивування клітин показник фагоцитозу достовірно (Р

ФАГОЦИТАРНА АКТИВНІСТЬ НЕЙТРОФІЛІВ КРОВІ ЛЮДИНИ У ГІПОТОНІЧНИХ СЕРЕДОВИЩАХ В ПРИСУТНІ АНТИБІОТИКІВ

PHAGOCYTIC ACTIVITY OF NEUTROPHILS OF HUMAN BLOOD IN HYPOTONIC MEDIUM BY ANTIBIOTIC ACTION

А.А. Міщенко, Е.М. Савельєва

A.A. Міщенко, Е.М. Савельєва

Досліджено фагоцитарну активність нейтрофілів крові людини в гіпотонічному середовищі та у присутності низки антибіотиків. Зниження тонічності в 1.5 -2.0 разів викликає збільшення параметрів фагоцитозу на 16%. У присутності фуросеміду дія гіпотонії не виявляється. Різні антибіотики викликають сильне пригнічення фагоцитозу.

Phagocytic reaction of human neutrophils в hypotonic medium and at presence of antibiotics був investigated. Tonicity decrease of medium in 1.5 - 2 times causa increase of phagocytosis parameters на 16 %. На furosemide presence action of hypotonia is not shown. Різні антибіотики спричиняють сильну запобігання фагоцитозу.

Ключові слова: нейтрофіл, фагоцитоз, фагоцитарна активність, гіпотонія.

Ключові слова: neutrophil, phagocytosis, phagocytic activity, hypotonycity.

Вступ

Основним бар'єром на шляху проникнення інфекції в організм є слизові оболонки. Будучи багатокомпонентними системами, вони беруть участь у багатьох реакціях організму, у тому числі імунних. У нормі в слизовій оболонці містяться імуноглобуліни та невелика кількість нейтрофілів та макрофагів. Саме ці клітини першими контактують з патогенами, у разі проникнення останніх у товщу тканин бар'єром стають лімфоїдні скупчення в товщі слизових.

Оскільки поверхні слизових оболонок не ізотонічні плазмі, для оцінки функціонування клітин імунної системи в таких умовах доцільно провести експерименти в анізотонічному середовищі in vitro. Так, показано, що у гіпотонічних розчинах у лейкоцитах активується кисневий вибух, метаболізм арахідонової кислоти, збільшується концентрація іонів кальцію. У роботі проведено дослідження фагоцитарної активності нейтрофілів крові при моделюванні гіпотонічних умов. Оскільки у разі запального процесу в організмі лікарями часто призначається антибіотична терапія, досліджено також дію антибіотиків різних класів на фагоцитарну активність нейтрофілів крові.

Об'єкти та методи

В експериментах використана венозна кров чоловіків донорів, отримана з Республіканської станції переливання крові (м. Сиктивкар). По 500 мкл крові поміщали у лунки планшета для імунологічних реакцій. Кожну лунку додавали суспензію дріжджових клітин (ТОВ «саф-Нева»), попередньо відмитих тричі 0.9% розчином NaCl. Кількість дріжджових клітин у середньому становила 30 тис/1 мкл крові.

Для зниження тонічності в 2.0 та 1.5 рази на лунки додавали дистильовану воду (рН 7.4). У ряді експериментів у лунки з ізо-і гіпотонічними середовищами додавали також фуросемід у концентрації 1*10-5 Моль/л.

В експериментах з антибіотиками в лунки додавали лінкоміцин, цефтріаксон, амоксиклав та гентаміцин у концентрації 30 мг/л.

Проби інкубували у термостаті при 370С протягом 20 хв. Потім планшет поміщали на лід для зупинки реакції фагоцитозу та з кожної лунки готували по 3 мазки. Після просушування та фіксації мазки фарбували за Гімза-Романовським, переглядали під мікроскопом при імерсійному збільшенні 15*90.

Підраховували: 1) фагоцитарну активність – кількість активних нейтрофілів із 100 зустрінутих під час перегляду; 2) фагоцитарний індекс -середня кількість дріжджових клітин, поглинених одним нейтрофілом. Результати оброблені металом парних порівнянь, достовірність відмінностей між вибірками оцінювали за критерієм Вілкоксона.

Результати та обговорення

У контролі фагоцитарна активність лейкоцитів людської крові становила 49.5±5%, фагоцитарний індекс – 1.64±0.1(n=20). Дані узгоджуються з результатами, отриманими щодо фагоцитозу патогенної Candida crusei . Фагоцитарна активність нейтрофілів у цих умовах стимулюється Р-глюканами в клітинній стінці дріжджів, до яких на поверхні фагоцитів є рецептори, а також опсонізуючим ефектом компонентів системи комплементу C3bi і імуноглобулінів IgG, що є в плазмі крові.

При зниженні тонічності середовища у 1.5 та 2.0 рази (n=20) фагоцитарна активність збільшилася в середньому на 16.5%, склавши 58.1±9.1% (p<0.05). Увеличился также фагоцитарный индекс до 1.97±0.06 и 2.14±0.58 при снижении тоничности в 1.5 и 2.0 раза соответственно. Таким образом, гипотония вызвала активацию фагоцитоза, что отразилось в увеличении как доли активных клеток, так и скорости поглощения фагоцитами дрожжей. Одним из механизмов такого

дії гіпотонії можливо збільшення концентрації внутрішньоклітинного кальцію, внаслідок чого змінюється цитоскелет клітин, їх рухливість і фагоцитарна активність. Крім того, активність клітин у цих умовах може змінюватися в результаті запуску реакції регуляторного зменшення об'єму, RVD, у відповідь набухання клітин. З метою виключити вплив останнього було проведено інгібування фуросемідом K+,Cl" - котранспорту, активація якого призводить до RVD. Оскільки речовина змінює хемотаксичну активність клітин, попередньо було досліджено його вплив в ізотонічній середовищі. При цьому фуросемід не змінював фагоцитарну активність нейтрофілів (n=2 ), що узгоджується з опублікованими даними На тлі гіпотонічного середовища фуросемід не змінював фагоцитарну активність у порівнянні з контролем і знижував її в порівнянні з результатами в гіпотонічному середовищі за відсутності речовини (p<0.05). В частности, в присутствии фуросемида фагоцитарная активность и фагоцитарный индекс составили 45.9±6.7%; 1.83±0.1 и 50.5±5.6%; 1.7±0.1 соответственно при

гіпотонії 1.5 та 2.0. Отже, блокуючи реакцію RVD, фуросемід тим самим запобігав активації клітин в умовах гіпотонії.

Під впливом антибіотиків показники фагоцитарної активності знизилися. При дії цефтріаксон фагоцитарна активність знизилася на 78% до 10±2.3% (р<0.02), амоксиклав - на 70% до 17±3.9% (р<0.02), линкомицин - на 65% до 16±4.9% (р<0.02), гентамицин - на 76% до 11±3.6% (р<0.02). Фагоцитарный индекс в экспериментах с антибиотиками практически оставался неизменным, следовательно, данные препараты не влияют на скорость поглощения клеток.

Підвищення фагоцитарної активності під впливом антибіотиків зазначено у низці робіт. Згідно з іншими даними, фагоцитарна активність лейкоцитів пригнічується при дії таких антибіотиків, як ауреоміцин. Оксітстрациклін, еритроміцин, хлорамфенікол, поліміксин не викликають помітних змін фагоцитарної активності лейкоцитів.

Використані в дослідах антибіотики по дії відносяться до різних груп. Амоксиклав і цефтріаксон діють як бактерицидні препарати (пригнічують розвиток клітинної стінки, причому пригнічують синтез специфічного для клітинної стінки бактерій пептидоглікану - муреїну). Лінкоміцин та гентаміцин при низьких концентраціях діють як бактеріостатики та бактерицидно – при збільшенні концентрації (інгібують синтез білка за рахунок зв'язування з 50s та 30s субодиницями рибосоми). Всі антибіотики в наших експериментах мали інгібуючий ефект на нейтрофіли. Це може бути пов'язано із зміною структури

антибактеріальних препаратів внаслідок метаболічних процесів в організмі, внаслідок чого продукти метаболізму стають токсичними для

самих фагоцитів. Антибіотики є однією з головних причин нейтропенії та агранулоцитозу. Даний ефект справили пеніциліни, цефалоспорини та сульфаніламіди. Аміноглікозид гентаміцин збільшує утворення лізосом, що містять різні фактори вірулентності. Представники Р-лактамних антибіотиків, амоксиклав та цефтріаксон, можуть пригнічувати реакцію окисного вибуху.

Дані про дію лінкозамінів, до яких належить лінкоміцин, на фагоцитарну активність суперечливі. При різних концентраціях препарату автори відзначають як підвищення фагоцитарної активності, і її зниження чи відсутність змін. Можливо, концентрація антибіотиків, що використовується в наших експериментах, була токсичною для клітин.

1. У контролі фагоцитарна активність та фагоцитарний індекс склали відповідно 49.5±5% та 1.64±0.1.

2. Заміна ізотонічного середовища на гіпотонічний викликає збільшення як фагоцитарної активності, так і фагоцитарного індексу відповідно на 16.5% та в 1.5-2 рази.

3. У присутності фуросеміду дія гіпотонії на фагоцитарну активність нейтрофілів не виявляється.

4. Антибіотики цефтріаксон, амоксиклав, лінкоміцин та гентаміцин викликають інгібування фагоциратної активності нейтрофілів на 78%, 76%, 65% та 70% відповідно.

1. Альошина О.М. Вивчення дії аморфного та кристалічного пені-цилінів на чумний мікроб // Тр. Ростовського-на-Дону ПЧІ. Ростов-на-Дону, 1959. Т. 15. Вип. 1. З. 153-160.

2. Ареф'єва Н.А., Азнабаєва Л.Ф. Імунні реакції слизової оболонки носа: цитологічна діагностика, методи лікування// Consilium Medicum. 2009. Т. 11. №11. З. 30-33.

3. Ізраельсон М.І., Шполянський Б.І., Боєвська Г.І. Вплив пеніциліну на функціональну здатність ретикуло-ендотеліальної системи та фагоцитарну активність лейкоцитів // Журн. мікро. епід. та імун. 1951. № 3. С. 59-62.

4. Лакін Г.Ф. Біометрія. М: Вища. школа, 1980. 291 с.

5. Фінкель Є.А., Луцька С.І. Аутовакцинотерапія при туберкульозі: Монографія. Киргизстан, 1972. 154 с.

6. Bazzoni F., Cassatella M.A., Laudanna C., Rossi F. Phagocytosis ofsoned nduces tumor necrosis factor - alpha mRNA accumulation and protein release by human polymorphnonuclear leucocytes // J. Leukoc. Biol. 1991. V. 50. №3. P. 223-228.

7. Czop J.K., Valiante N.H., Janusz M.J. Phagocytosis particulate activators of human alternative complement pathway thought monocyte beta-glucan receptors // Prog. Biol. Res. 1989. V. 297. P. 287-296.

8. De Weck A.L. Pharmacologic and and immunochemical mechanisms of drug hypersensitivity // Immunol Allergy Clin North Am. 1991. № 11. Р. 461-474.

9. Gilliland B.C. Drug-induced autoimmune and hematologic disorders // Immunol Allergy Clin North Am. 1991. № 11. Р. 525-553.

10. Hiura M., Ozawa M., Othsuka T. a. o. Стимулювання superoxide anion production в guinea pig polimorphonuclear leucocytes by hypotonic condition with protein kinase C activators // Arch. Biochem. Biophys. 1991. C. 15. № 291. Р. 31-37.

11. Kishi K., Hirai K., Hiramatsu K., Yamasaki T., Nasu M. Clindamycin suppresses endotoxin виконаний з ceftazidime-treated Escherichia coli O55: B5 і subsequent production tumor necrosis factor alpha and interleukin- Agents Chemother. 1999. V. 43. № 3. Р. 616-22.

12. Kovaks T., Stas I. та ін. Volume regulatory mechanisms of human granulocytes in hipoosmotic media // Acta Biochim. Biophys. Hung. 1989. V. 24 № 1-2. P. 142-147.

13. De Weck A.L. Pharmacologic and and immunochemical mechanisms of drug hypersensitivity // Immunol Allergy Clin North Am. 1991. № 11. Р. 461-474.

14. Labro M.T. pharmacology of spiramycin in comparison with other macrolides // Drug Invest 1993. 6. Suppl 1. Р. 15-28.

15. Lachani M., Usmani S. та ін. In vitro ефект furosemideon hemiluminescence polymorphonuclear neutrophils in preterm infants // Biol.Neonate. 1997. V. 72. №3. P. 142147.

16. Muniz-Junqueira MI, Mota LM, Aires RB, Junqueira LF Jr. Digitalis inhibits and furosemide не змінює in vitro phagocytic function of neutrophils of healthy subjects // Int Immunopharmacol. 2003. V. 3. №10-11. P. 1439–1445.

17. Munoz J., Geister R. Inhibition of phagocytosis by aureomycin // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1950. V. 75. № 2. Р. 367-370.

18. Richardson M.D., Donaldson F. Interaction of Candida crusei з людськими neutrophils in vitro // J. Med. Microbiol. 1994. V. 41 № 6. P. 380-388.

19. Vetvica V., Thornton BP, Ross CP. Soluble beta-glucan polysaccharide binding до lectin site of neutrophil or natural killer cell complement receptor type 3 (CD 11b/CD 18) generates aprimed state of receptor capable of mediating citotoxicity of IC3b - opsonized target cells // J. Clin. Invest. 1996. V. 98. P. 50-61.

Дослідження фагоцитарної активності лейкоцитів– аналіз крові, який спрямований на визначення резервних можливостей нейтрофілів та моноцитів до виконання їх основної функції – поглинання та переробки чужорідних агентів. Тест виконується у комплексі імунограми. Він показаний пацієнтам з рецидивуючими та хронічними інфекціями, набутими та генетичними імунодефіцитними станами, аутоімунними та онкологічними захворюваннями, що перенесли складні операції, у тому числі з трансплантації органів. Аналізу піддається цілісна кров. Дослідження ґрунтується на оцінці фагоцитозу бактерій з флуоресцентними мітками. У нормі фагоцитуючі гранулоцити становлять від 82% до 90% від загальної кількості, фагоцитуючі моноцити – від 75% до 85%. Готовність результатів – до 8 днів.

Фагоцитарна активність лейкоцитів – лабораторний показник, який відображає відсоток нейтрофілів та моноцитів, здатних до зв'язування з патогенною мікрофлорою та її перетравлення. Фагоцити – клітини, що захищають організм від розвитку інфекцій. Вони вважаються компонентом вродженого імунітету, у крові представлені двома видами лейкоцитів – моноцитами та нейтрофілами. Моноцити є великими клітинами макрофагами. Вони мають виражену здатність до поглинання, переробляють великі за розмірами клітини і органічні сполуки. У місці запалення вони фагоцитують бактерії, лейкоцитарну масу, уражені клітини. В результаті тканини очищаються та готуються до регенерації. Нейтрофіли відносяться до мікрофагів, на відміну від моноцитів поглинають лише невеликі клітини та органічні компоненти. Після переробки агентів нейтрофіли гинуть, вивільняють речовини, які ушкоджують бактерії та грибки, посилюють приплив імунних клітин до осередку запалення.

Аналіз крові на фагоцитарну активність лейкоцитів дозволяє оцінити резерв моноцитів та нейтрофілів до перетравлення чужорідних агентів. Зміна характеристик фагоцитів відображає не тільки імунологічну реактивність організму, але й особливості деяких інших процесів – білкового та вуглеводного обміну, наявність інтоксикації та виснаження організму, активність відновлення після захворювань тощо. та у ревматології, онкології, хірургії. Результати дослідження відображаються як відсоток активних фагоцитів до їхньої загальної кількості. Виявлення активних нейтрофілів та моноцитів проводиться за допомогою бактерій з флуоресцентними мітками. Біоматеріалом для дослідження є цільна кров із гепарином.

Показання

Дослідження фагоцитарної активності лейкоцитів показано за підозри на вроджений чи набутий імунодефіцит. Воно призначається при затяжних, хронічних та рецидивуючих інфекційних захворюваннях – характерною ознакою зниження імунітету. Найчастіше на аналіз спрямовуються пацієнти з пневмонією, синуситом, отитом, ентероколітом, кандидозом, циститом. Також про недостатність імунного захисту можуть свідчити рани, що тривало не гояться, ускладнення після операцій. Тому аналіз виконується при підготовці до хірургічного втручання та при ускладненому перебігу післяопераційного періоду, при тривалому відновленні після травм та опіків. До інших показань для цього дослідження відносяться алергічні, аутоімунні та онкологічні захворювання. Результати дозволяють оцінити активність імунного захисту (фагоцитозу) та її роль у розвитку хвороби.

Аналіз крові на фагоцитарну активність лейкоцитів дозволяє визначити фактичну готовність організму до протистояння інфекціям. Однак варто пам'ятати, що цей показник змінюється під впливом багатьох факторів. Так, активність моноцитів та нейтрофілів знижується після фізичного навантаження та при розумовій втомі, а після прийому калорійної їжі підвищується. Ще одним обмеженням аналізу і те, що процедура дослідження займає до 8 робочих днів, отримані результати відбивають стан тижневої давності.

Підготовка до аналізу та забір матеріалу

Для дослідження фагоцитарної активності лейкоцитів проводиться забір крові із вени. За день до аналізу слід виключити з раціону алкоголь, скасувати спортивні тренування та інші інтенсивні фізичні навантаження, уникати стресових ситуацій. Також необхідно проконсультуватися з лікарем про вплив ліків на результат дослідження, можливо, деякі препарати будуть тимчасово відмінені. Процедура забору крові, як правило, проводиться з ранку, після нічного періоду голодування або через 4 години після їди.

Кров береться з ліктьової вени з допомогою пункції, на дослідження фагоцитарної активності лейкоцитів найчастіше використовується метод оцінки фагоцитозу бактерій з флуоресцентною міткою. З крові шляхом центрифугування та відмивання виділяють моноцити та нейтрофіли – досліджуваний матеріал. Потім зразок вводять культуру люмінесцентних бактерій, суміш ресуспендують і інкубують, за інтенсивністю люмінесценції визначають кількість лейкоцитів, що фагоцитували бактерії. Результати аналізу готуються протягом 7-8 робочих днів. Фагоцитарна активність моноцитів і нейтрофілів може бути визначена й іншими методами, наприклад, фарбуванням клітин, що фагоцитували (метод Романовського-Гімзи), за активністю лізосомальних ферментів, виробництва цитокінів, присутності катіонних білків.

Нормальні значення

Результат аналізу крові на фагоцитарну активність лейкоцитів виявляється у відсотках фагоцитуючих клітин від їх загальної кількості. Значення норми гранулоцитів – від 82 до 90%, для моноцитів – від 75 до 85%. Ці показники однакові для пацієнтів різного віку та обох статей. Фізіологічне зниження фагоцитозу може визначатися під час вагітності, після фізичного навантаження, що не відповідає рівню підготовки, та після емоційного стресу.

Підвищення та зниження показника

Підвищення фагоцитарної активності лейкоцитів немає діагностичної значущості, причиною можуть стати гострі інфекції. Активність моноцитів та нейтрофілів збільшується щодо вихідного рівня.

Аналіз фагоцитарної активності лейкоцитів належить до імунологічних методів дослідження. Його показники дозволяють визначити резервні здібності клітин крові до поглинання та перетравлення інфекційних агентів, тобто готовність організму протистояти розвитку захворювання. Якщо результати аналізу нижче норми, необхідно проконсультуватися з лікарем – імунологом, інфекціоністом, хірургом, ревматологом, онкологом. Фізіологічне зниження показників можна скоригувати правильним підбором фізичного навантаження, профілактикою стресу.